pGenesil-1-EGFP-shRNA/survivin真核表达载体构建及其表达验证

来源 :湖北民族学院学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:mikesh123
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目的构建用survivin启动子驱动增强绿色荧光蛋白(EGFP)的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/survivin并验证其在宫颈癌Caski细胞中的表达。方法用有活性的survivin启动子取代pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6载体中的U6启动子从而获得新的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/survivin;将pGenesil-1-EGFP-shBNA/survivin转染到宫颈癌Caski细胞及正常人脐静脉内皮HuVEC细胞,观察EGFP在两种细胞中的表达变化。结果成功构建pGenesil-1-EGFP-shRNA/survivin载体,分别转染Caski及HuVEC细胞,在Caski细胞中观察到较少的绿色荧光蛋白表达,而在HuVEC细胞中观察到较多的绿色荧光蛋白表达。结论survivin启动子能驱动shRNA在宫颈癌Caski细胞中特异性表达,而在正常HuVEC细胞中不表达。
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