人脐带间充质干细胞向肝细胞分化过程中长链非编码RNA核富集转录本1的作用

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gwq939
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景:人脐带间充质干细胞在体外借助细胞因子可以诱导分化为肝样细胞,但是形成的肝样细胞功能上尚不够成熟.研究发现长链非编码RNA与细胞分化关系密切,并通过干预某些长链非编码RNA的表达达到了促进细胞分化的目的.目的:探讨长链非编码RNA核富集转录本1对人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的影响.方法:建立人脐带间充质干细胞向肝细胞分化体系,用糖原染色和吲哚菁绿摄取实验评价肝细胞功能特性,qRT-PCR检测肝细胞特异性基因及核富集转录本1的mRNA表达.然后通过构建慢病毒干扰核富集转录本1表达,转染7 d后得到稳定转染的细胞株,然后进行肝向诱导分化4周,设立转染空质粒的阴性对照组,未进行病毒转染的对照组,qRT-PCR、Western blot检测肝细胞特异性基因和蛋白表达.结果 与结论:①经糖原染色后可见细胞胞质内有红、紫色糖原颗粒,吲哚菁绿摄取后可见大量深绿色吲哚菁绿阳性细胞;②随着诱导时间延长,白蛋白、细胞色素酶P4503A4 mRNA表达量逐渐增加,核富集转录本1的mRNA表达量逐渐降低;③与阴性对照组和未转染对照组比较,在干扰核富集转录本1表达后,白蛋白、细胞色素酶P4503A4 mRNA和蛋白表达均明显增加;④结果表明,长链非编码RNA核富集转录本1可能参与了人脐带间充质干细胞向肝细胞的分化.
其他文献
背景:糖尿病溃疡作为糖尿病的常见并发症之一,其低愈合率和高截肢率已严重危害人类健康,尽管目前多种中医外用膏药已证实能促进创面愈合,但其发挥作用的分子机制尚未明确.目的:探讨石香膏治疗糖尿病溃疡创面的可能作用机制.方法:将40只清洁级雄性SD大鼠随机分正常对照组、糖尿病溃疡组、细胞生长因子组、石香膏组,每组10只.除正常对照组外,其余3组均制备糖尿病大鼠模型;1周后4组均采用全层皮肤缺损法制备溃疡创面模型.造模成功1周后,石香膏组、细胞生长因子组分别给予外用细胞生长因子及外敷石香膏干预,糖尿病溃疡组及正常对
背景:经皮椎体强化治疗后残余痛是影响患者生活质量的严重并发症之一,也是困扰临床医生的难题.目前已有一些研究分析了椎体强化治疗后残余痛的危险因素,但不够全面且发生机制不甚清晰.目的:分析骨质疏松性胸腰椎压缩骨折椎体强化治疗后残余痛的危险因素,并探讨其发生机制.方法:选择2019年10月至2021年1月在江苏省苏北人民医院脊柱外科接受经皮椎体强化治疗的骨质疏松性椎体压缩骨折的患者共217例.术后1周及术后1,3,6个月内任意一次随访目测类比评分≥4分则认为有术后残余痛,依据有无残余痛的情况分为残余痛组(n=3
背景:临床上高氧导致的高氧性急性肺损伤越来越受到人们的关注.研究显示,沙丁胺醇能够减轻大鼠的炎性反应,提高多种抗氧化物质的活性,改善微循环,从而减轻肺水肿的程度,对肺组织起到一定的保护作用.目的:探究沙丁胺醇减轻高氧性急性肺损伤的效果及其作用机制.方法:将SD大鼠分为对照组、不同时间高氧处理肺损伤模型组和不同剂量沙丁胺醇雾化给药治疗组(0.025,0.05,0.1,0.2,0.4 mg/kg).通过测定各项生化指标确定最佳的高氧(>95%)处理时间和沙丁胺醇使用剂量;随后分别用qRT-PCR、Wester
背景:酒精性股骨头坏死与饮酒具有高度的相关性,然而其具体发病机制尚不明确且存在一定的个体差异.目的:构建酒精性股骨头坏死的基因网络图谱,进一步探索酒精性股骨头坏死的潜在发病机制.方法:从广西中医药大学第一附属医院骨二科招募3例酒精性股骨头坏死患者和3名健康志愿者,通过对其外周血进行基因测序筛选具有差异表达的mRNA和lncRNA,通过预测lncRNA-miRNA和miRNA-mRNA的相互作用靶点,使用cytoscape软件构建竞争性内源RNA调控网络.结果 与结论:①通过差异表达分析从酒精性股骨头坏死样
背景:骨质疏松是一种以骨量减少、骨微结构改变为主要特征的全身性代谢疾病,现有的药物治疗效果有限且不良反应明显,而骨髓间充质干细胞来源外泌体因其非免疫原性等优势,有望成为治疗骨质疏松的新方法.目的:探讨褪黑素预处理骨髓间充质干细胞后提取的外泌体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及作用机制,分析其作为无细胞方式促进成骨治疗骨质疏松的可行性.方法:采用全骨髓贴壁法分离大鼠原代骨髓间充质干细胞并鉴定;超高速离心法提取骨髓间充质干细胞中的外泌体(NC-Exos)和褪黑素预处理骨髓间充质干细胞中的外泌体(MT-Exos
背景:间充质干细胞具有治疗糖尿病、移植物抗宿主病、卵巢早衰等多种疾病的潜能,但是传统培养方法存在着细胞增长缓慢、容易衰老等问题.生理性低氧有望改善间充质干细胞的生物学性能,因而有可能作为优化的培养方法.目的:探究生理性低氧对脐带间充质干细胞和经血源性间充质干细胞生物学特性的影响.方法:将脐带间充质干细胞和经血源性间充质干细胞分别在21%、5%氧体积分数条件下培养,测定细胞的表面标志物、贴壁效率、增殖能力、细胞凋亡、细胞衰老、葡萄糖乳酸代谢和细胞分化等指标.结果 与结论:①低氧可以促进两种来源间充质干细胞的
背景:电针干预曲池、足三里穴位能够起到神经保护作用,改善患者的运动功能,然而针对其作用机制的深入研究则相对较少.目的:基于神经调节蛋白1/表皮生长因子受体4信号通路观察电针干预对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经保护作用.方法:取90只SPF级雄性Wistar大鼠,采用改良线栓法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型,并随机分为模型组、非穴位组和穴位组;另取30只大鼠只予以左侧颈部血管的分离作为假手术组.造模后3 h,非穴位组用电针刺激右侧肢体腋横纹下和尾骨尖下3 mm的非穴位处,穴位组用电针刺激曲池和足三里,共治疗7
背景:目前骨髓间充质干细胞已在软骨损伤治疗中取得了显著成效,但与其相比,鼻黏膜间充质干细胞移植具有更多优势,例如取材方便患者更易接受、可安全活检不损伤嗅觉.目的:探索骨髓间充质干细胞和鼻黏膜间充质干细胞在转化生长因子β3作用下的成软骨诱导效果差异.方法:体外分离培养SD大鼠鼻黏膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞,用含有转化生长因子β3的成软骨诱导分化培养基分别进行成软骨诱导,相应的对照组用不含有转化生长因子β3的成软骨诱导分化培养基培养.在第7,14天行整体结构观察,并提取细胞RNA与蛋白,采用RT-PCR
背景:脊髓损伤会使星形胶质细胞增生进而形成胶质瘢痕阻碍神经轴突的形成,而局部炎症微环境进一步加重了神经元的死亡,因此,将星形胶质细胞转分化为神经元既能减轻星形胶质细胞的增生又能增加神经元的数量,可谓是一举两得.而有关外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡能否诱导星形胶质细胞转分化为神经元尚未见相关报道.目的:探索外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡能否诱导星形胶质细胞转分化为神经元.方法:①采用组织块直接培养法培养SD大鼠鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,并且根据其形态以及免疫荧光进行鉴定,收集细胞上清液以提取细胞外囊
背景:尽管大多数骨折能够治愈,但仍有5%-10%最后发展为骨不连,临床试验证实高压氧可以通过血液循环显著提高体内动脉血氧分压,促使新陈代谢,加速骨愈合.目的:探讨高压氧干预不同时间对家兔股骨骨折愈合的影响和相关机制.方法:12只新西兰大白兔建立股骨骨折模型,随机分成高压氧治疗1个月组、高压氧治疗2个月组、常氧治疗1个月组、常氧治疗2个月组,每组3只.高压氧治疗组于术后第1天开始将所有动物置入高压氧动物仓中行高压氧治疗1,2个月,采用酶联免疫吸附法检测血清骨钙素、Ⅰ型胶原C端肽水平,苏木精-伊红染色观察骨折