【摘 要】
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目的 研究沙蟾毒精（arenobufagin, ARE）对急性白血病细胞的凋亡诱导作用及可能的分子机制。方法 急性白血病细胞Jurkat和MV-4-11经不同浓度（0、10、20、40、80 nmol/L）ARE作用24 h, 80 nmol/L ARE作用不同时间（0、6、12、18、24 h）或ROCK1抑制剂Y-27632（20μmon/L）预处理1 h后80 nmol/L ARE作用24
【机 构】
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陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系生药学与中药学教研室
【基金项目】
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','0001','ApLJNybhrH-9KFRZ4dAaWaH8MzCi_eP-k2iJnT-xuol0eyrEynQvWQ==');
">国家自然科学基金面上项目（31571425）；
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目的 研究沙蟾毒精（arenobufagin, ARE）对急性白血病细胞的凋亡诱导作用及可能的分子机制。方法 急性白血病细胞Jurkat和MV-4-11经不同浓度（0、10、20、40、80 nmol/L）ARE作用24 h, 80 nmol/L ARE作用不同时间（0、6、12、18、24 h）或ROCK1抑制剂Y-27632（20μmon/L）预处理1 h后80 nmol/L ARE作用24 h,采用MTT检测ARE抑制急性白血病细胞增殖的能力；采用流式细胞术检测ARE诱导急性白血病细胞凋亡的能力；采用Western blot和CoIP实验检测急性白血病细胞经ARE作用后细胞中凋亡相关蛋白和Rho A/ROCK1信号通路相关蛋白的变化情况。结果 ARE对Jurkat和MV-4-11细胞的抑制增殖作用呈剂量依赖性和时间依赖性（P<0.01）,对Jurkat和MV-4-11细胞凋亡诱导作用亦呈剂量和时间依赖性（P<0.01）;Western blot检测结果显示：ARE可激活ROCK1信号通路，促进BAX移位至线粒体，Cytochrome c （Cyto c）和AIF由线粒体释放入细胞质，增加Caspase 3和Caspase 7剪切激活，增加PARP1剪切，并减少XIAP表达，其上述作用具有剂量依赖性和时间依赖性（P<0.01）;使用Y-27632抑制ROCK1信号通路可明显阻断ARE诱导的BAX移位至线粒体、Cyto c和AIF向细胞质的释放、Caspase 3和Caspase 7的剪切激活、PARP1的剪切、XIAP表达的下调以及细胞凋亡（P<0.01）。结论 ARE通过激活Rho A/ROCK1信号通路有效诱导急性白血病细胞（Jurkat、MV-4-11）发生凋亡。
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