【摘 要】
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目的 研究中国南部部分地区肝细胞癌患者中是否存在特征性HBx基因突变,以及基因变异在肝癌发病中的作用.方法 采用巢式PCR,单链构象多态分析(SSCP)、异源性双链分析(HA)和DNA
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目的 研究中国南部部分地区肝细胞癌患者中是否存在特征性HBx基因突变,以及基因变异在肝癌发病中的作用.方法 采用巢式PCR,单链构象多态分析(SSCP)、异源性双链分析(HA)和DNA测序等方法对51份肝细胞癌组织石蜡包埋切片标本和25份HBV携带者血清HBx基因多态性进行分析,对有明显缺失变异的HBx基因进行克隆,转染肝细胞,通过体外和体内实验比较变异和野生型HBx基因转染对肝细胞QSG7701生物学行为的影响.结果 肝癌组织中HBx基因存在点突变和缺失型突变,B和C基因型之间突变类型和数量有一定差异,C基因型点突变频率更高(t=-2.522,P《0.05),而B基因型存在缺失变异(HBx-d382和HBx-d431).获得了含HBx缺失变异的基因的稳定转染细胞株.该细胞株细胞大小形态不一、体积增大、核浆比例增大,生长速度更快,克隆形成率高(P《0.05),在裸鼠体内成瘤机会和速度更快.结论 HBx基因在肝细胞癌组织中频繁地发生突变,nt 382～400位置上的缺失型突变体转染QSG7701后能促进肝细胞的生长速度,细胞凋亡减少,使之获得肿瘤性细胞特性,因此HBx-d382缺失型突变体可能在中国南部部分地区肝癌发生发展中发挥重要作用.
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