【摘 要】
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目的:探讨miRNA-409-3p/Beclin-1信号轴在小细胞肺癌耐药中的作用机制.方法:qRT-PCR检测用于分析基因表达情况;Western blot检测蛋白表达情况;mimic NC、miRNA-409-3p mimic
【机 构】
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830000 乌鲁木齐,新疆维吾尔自治区人民医院 肿瘤科;848000 新疆和田,新疆维吾尔自治区人民医院皮山医院 全科医疗科
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目的:探讨miRNA-409-3p/Beclin-1信号轴在小细胞肺癌耐药中的作用机制.方法:qRT-PCR检测用于分析基因表达情况;Western blot检测蛋白表达情况;mimic NC、miRNA-409-3p mimic、pcDNA3.1质粒和pcDNA3.1-Bec-lin-1质粒分别转染依托泊苷(VP16)和顺铂(DDP)耐药的小细胞肺癌细胞系SBC-5/EP;荧光素酶活性分析实验用于检测基因靶向关系;GFP-LC3绿色荧光融合蛋白实验用于检测细胞自噬;克隆形成实验和流式细胞术实验用于检测细胞的增殖和凋亡;MTT法用于检测细胞对VP16-DDP的敏感性.结果:在VP16-DDP耐药的小细胞肺癌组织和小细胞肺癌细胞(SBC-5/EP)中,miRNA-409-3p表达量低,Beclin-1表达量高;荧光素酶活性分析实验显示miRNA-409-3p靶向作用于Beclin-1;miRNA-409-3p mimic可抑制SBC-5/EP细胞自噬和增殖,促进细胞凋亡,提高SBC-5/EP细胞对VP16-DDP的敏感性,抑制PI3KC3和Vpsl5蛋白表达.pcDNA3.1-Beclin-1可逆转miRNA-409-3p mimic对SBC-5/EP细胞自噬和增殖的抑制作用、对细胞凋亡的促进作用、对VP16-DDP药物敏感性的提高作用,以及对PI3KC3和Vpsl5蛋白表达的抑制作用.结论:miRNA-409-3p通过靶向作用于Beclin-1而抑制VP16-DDP耐药的小细胞肺癌细胞的自噬和增殖,促进细胞凋亡,提高耐药的小细胞肺癌细胞对VP16-DDP的药物敏感性,可能与PI3KC3/Vpsl5信号通路相关.
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