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摘要 2018年春季對77份烟草种质资源进行田间鉴定及繁种更新，其中烤烟51份、晒烟26份，对参试种质进行了主要特征特性的数据采集。结果表明，参试种质间生育期、形态特征、主要农艺性状等差异较大;不同生育期变异系数为7.4%～17.0%，由高到低依次为移栽至现蕾天数、移栽至中心花开放天数、全生育期、苗龄。大埔多叶烟的全生育期最长（197.0 d），而茅天镇小鸡尾最短（126.0 d）;不同品种的主要农艺性状变异系数为11.3%～26.5%，变异系数从大至小依次为节距、叶长、叶宽、茎叶角度、叶数、株高、茎围、花冠长度、花冠直径、花萼长度、主侧脉夹角;普通烟草花叶病（TMV）的田间自然发病最严重，青枯病次之，黄瓜花叶病（CMV）、黑胫病、马铃薯Y病（PVY）零星发生，广烟127、YK1085、SR1307、多抗6号等45份资源发病率为0，其余22份资源不同程度发生田间自然病害。参试67份种质种子发芽率符合入库要求。
关键词 烟草;种质资源;繁种更新;广东省
中图分类号 S572文献标识码 A
文章编号 0517-6611（2019）16-0033-04
Propagating and Identification for Tobacco Germplasm Resources in Guangdong Province
MA Zhu wen1，2， LI Xiang he1，2， HUANG Zhen rui1，2 et al （1.Crops Research Institute of Guangdong Academy of Agricultural Sciences，Guangzhou，Guangdong 510640;2.Guangdong Provincial Key Laboratory of Crops Genetics and Improvement， Guangzhou， Guangdong 510640）
Abstract Propagating and regeneration for 77 tobacco germplasm resources was carried out in the spring of 2018， including 51 of flue cured tobacco and 26 of air cured tobacco. And the data collection of main characteristics was conducted. The results showed that there were great differences in the growing period duration， morphological characteristics and main agricultural characters among the germplasms. The variable coefficients of the growth periods were 7.4%-17.0%， which were in the order （from high to low） of budding flower open days， flowering period， whole growth period and seedling period. Dapuduoyeyan had the longest whole growth period （197.0 d）， while Maotianzhenxiaojiwei had the shortest growth period （126.0 d） . Variation coefficients of main agronomic characters of different varieties were 11.3%-26.5% ， which were in the order（from high to low） of node interval， leaf length， leaf width， angle between stem and leaf， leaf number， plant height， corolla diameter， calyx length， stem girth， corolla length， angle between main vein and lateral veins. Tobacco mosaic virus （TMV） was the most severe natural disease occurred in the field， followed with bacterial wilt， while cucumber mosaic virus （CMV）， black shank and potato virus Y （PVY） showed sporadic outbreaks. Indcidence rates of Guangyan 127， YK1085， SR1307， Duokang 6 and other 41 germplasm resources were 0， and the rest 22 germplasm resources showed natural diseases in fields in different degrees. Germination rate of 67 tested germplasm resources met the requirements of storage. Key words Tobacco;Germplasm resource;Propagating and regeneration;Guangdong Province
烟草种质资源是烟草遗传理论研究、生物技术研究和烟叶生产的宝贵资源和重要战略物资[1]，是烟草行业可持续发展的物质基础，也是开展培育烟草新品种的前提和保证[2]。广东省的烟草种质资源收集工作始于20世纪50年代初期，经过几代人的不懈努力，目前收集、保存各类烟草种质资源 1 490份，其中广东地方烟草种质资源（农家品种）180余份[3-4]。由于保存的种质资源数量较大，而烟草种质资源主要以种子形态在特定环境中进行保存，一定时间后种子发芽率逐渐下降，如不及时进行更新，最终将丧失活力。为了有效地保护这些种质资源，必须按照计划分年度进行繁种更新，以保证烟草种质的长期保存。刘艳华等[5]系统总结了烟草种质资源长期研究所形成的繁种更新理论与技术。田间鉴定是烟草种质资源繁种更新的主要内容之一，能对繁种更新的种质进行性狀鉴定和相关的理论研究。许美玲等[6]在云南德宏开展72份雪茄烟种质的田间试验筛选出优质抗病的雪茄烟种质资源，明确每份资源的特征特性[7]、使用价值[8]，并有效地加以利用[9-10]。鉴于此，笔者对77份烟草种质资源进行田间鉴定及繁种更新，并对参试种质进行了主要特征特性的数据采集。
1 材料与方法
1.1 试验材料
参试77份烟草材料来自广东省农业科学院作物研究所，其中烤烟51份，晒烟26份（表1）。
1.2 试验方法 试验在广东省农业科学院钟落潭白云试验基地进行。按调制类型分区，设烤烟区和晒烟区，不同调制类型间及试验区周边分别设保护行。各类型间及同一类型内随机排列，单行植，不设重复，行距1.2 m，株距0.5 m，每小区植烟32株。
试验材料采用点穴方式播种，浅水育苗。2018年1月9日播种，3月18日移栽。移栽后及时进行中耕培土，结合小培土和大培土进行施肥，氮磷钾比例1∶1∶2。中心花开放后，每份种质资源选择10株植株套袋，套袋前进行摘花摘果，及时人工抹除腋芽。
1.3 调查项目及方法
生育期按生长情况记载;形态特征通过大田调查记载;主要病害根据田间自然发病情况调查，计算发病率和病情指数;每份种质选择5株有代表性的烟株进行主要农艺性状调查，计算平均值;发芽率测定，每份种质取种子100粒，以培养皿上加一张滤纸为发芽床，培养7 d计算发芽势，14 d计算发芽率，3次重复[11]。
试验数据采用Excel 2016及SPSS 22.0软件进行统计 分析。
2 结果与分析
2.1 参试烟草种质资源的生育期比较
从表2可以看出，参试种质资源的苗龄（烟苗播种至完成第六片真叶生长天数）为53.0～72.0 d，其中河源龙川1125苗龄最短（53.0 d），桐乡烟最长（72.0 d）;移栽至现蕾54.0～96.0 d，其中河源龙川1201为54.0 d，大埔多叶烟为96.0 d;移栽至中心花开放 65.0～102.0 d，其中河源龙川1201为65.0 d，大埔多叶烟为 102.0 d;全生育期126.0～197.0 d，茅天镇小鸡尾生育期最短（126.0 d），大埔多叶烟生育期最长（197.0 d）。移栽—现蕾天数变异系数最大，为17.0%;苗龄变异系数最小，为7.40%，说明移栽至现蕾期能较好区分烟草种质间生育期特征差异，而种质间生育期特征在苗期差异较小。
2.2 参试烟草种质资源的植物学形态特征比较
从表3可以看出，参试77份烟草种质中，烟株株型包括塔形、筒形和橄榄形，其中以塔形为主，占67.5%;叶形包括椭圆形、长椭圆形、宽椭圆形，披针形，其中以长椭圆形为主，占67.5%;叶尖包括急尖、渐尖、尾状，其中以渐尖为主，占53.2%;叶面包括皱、较皱、较平、平，以较平为主、占44.2%。叶色包括深绿、绿、黄绿，其中以绿为主，占76.6%;叶片厚薄包括厚、较厚、较薄、薄，其中以较厚为主，占57.1%;叶片主脉粗细包括粗、中、细，其中以中为主，占51.9%;叶耳包括大、中、小、无，其中以中为主，占36.4%;花序密度包括密集和松散，其中以松散为主，占80.5%;花序形状包括球形、扁球形、倒圆锥形、菱形，其中以菱形为主，占62.3%;蒴果形状包括卵圆形、长卵圆形、圆形，其中以卵圆为主，占67.5%;花色包括深红、红、淡红、白，其中以淡红为主，占63.6%。
2.3 参试烟草种质资源的主要农艺性状比较
参试77份种质的烟株株高为82.0～270.0 cm，均值为174.2 cm;茎围为 6.3～10.1 cm，均值为8.4 cm;节距为2.8～8.1 cm，均值为 4.9 cm;叶数为12.5～48.2片，均值为28.6片;，叶长为44.2～81.1 cm，均值为60.4 cm;叶宽为15.6～36.3cm，均值为 25.3 cm;主侧脉夹角为48.3～76.3°，均值为63.5°;茎叶夹角 38.6°～79.6°，均值为65.1°，花冠长度为3.2～5.4 cm，均值为 4.7 cm;花冠直径为1.8～3.1 cm，均值为2.5 cm;花萼长度为1.2～2.6 cm，均值为1.7cm;变异系数为11.3%～26.5%，其中节距（26.5%）最大，叶长（22.2%）、叶宽（22.1%）次之，而主侧脉夹角变异系数（11.3%）最小。 2.4 参试烟草种质资源的田间自然发病情况比较
参试77份烟草种质中，普通烟草花叶病（TMV）发病率为0～100%、均值为25.00%，病情指数为0～53.2、均值为10.8，其中粤烟134、广烟127、YK1085等22份资源发病率为0，而Va116全部植株发病;黄瓜花叶病（CMV）发病率为0～32.5%、均值为8.5%，病情指数为 0～18.4、均值为4.5;黑胫病发病率为0～ 6.00%、均值为0.8%，病情指数为0～2.4、均值为0.2;马铃薯Y病（PVY）发病率为0～7. 9%，均值为0.16%，病情指数为 0～0.84、均值为0.17;青枯病发病率为0～34.0%、均值为 4.5%，病情指数为0～18.5、均值为1.8。其中，广烟127、YK1085、SR1307、多抗6号等45份资源发病率为0，其余22份资源不同程度发病。
2.5 参试烟草种质资源的种子发芽情况比较
种子发芽率是衡量种子质量的重要指标之一。国内外种质资源库繁殖更新的发芽率標准通常在65%～85%;国际植物遗传资源研究所（IPGRI）推荐发芽率标准为85%或活力下降15%，最低临界值为65%;我国国家农作物种质资源库则以发芽率下降到60%为自花授粉作物（自交系）繁殖更新的临时执行指标[4]。参试77份种质资源的种子发芽势平均为79.6%，发芽率平均为81.8%，其中有67份种质发芽率高于75%，符合烟草种质资源入库标准，10份种质资源仍有待秋烟继续重繁。
3 结论与讨论
该试验通过对参试种质调查和分析表明，参试种质具有丰富的遗传多样性。其中，生育期变异系数由大到小依次为移栽至现蕾天数、移栽至中心花开放天数、全生育期、苗龄;形态特征的差异主要表现在株型、叶形、叶尖、叶耳、叶色、叶片厚薄等;主要农艺性状的差异由大到小依次为节距、叶长、叶宽、茎叶角度、叶数、株高、茎围、花冠长度、花冠直径、花萼长度、主侧脉夹角。
广东省收集和保存的烟草种质资源数量较多，其遗传多样性较丰富，为优良基因性状的挖掘和利用奠定了良好的种质基础。参试种质中，烤烟种质广烟127、Yk1085、粤烟134、黄坑20号及晒烟种质棍子烟、桐乡烟、高要区金利罗新烟的株型和叶形较好、叶片厚薄适中、农艺性状优良，因此可继续进行品质鉴定[12-13]。普通烟草花叶病、青枯病是广东地区烟株常发病害，对烟叶生产危害极大，该试验中广烟127、粤烟134、多抗6号、棍子烟、筑波一号等种质的普通烟草花叶病、青枯病田间自然发病率为0，可进一步开展人工接种鉴定和病圃鉴定[14-16]，从而确定其抗性水平，为抗病育种提供抗源。里姆斯23、G126、Ti165、晋太33、金黄柳-2、阳溪镇大黑烟、务川小团叶子、濯水黑大烟、红丝乡大茄花烟、务川黑烟共10份种质资源仍需秋烟继续重繁。
参考文献
[1] 张兴伟， 冯全福， 杨爱国，等. 中国烟草种质资源分发利用情况分析[J]. 植物遗传资源学报，2016，17（3）： 507-516.
[2] 王志德，牟建民，刘艳华，等.我国烟草种质资源平台建设状况与发展思路[J]. 中国烟草科学，2009，30（S1）：1-7.
[3] 马柱文， 陈俊标， 张振臣，等. 广东烟草种质资源繁种更新试验[J]. 广东农业科学， 2015， 42（12）： 44-48.
[4] 谭铭喜，陈俊标，李淑玲，等.广东省烟草种质资源特异性分析[J].广东农业科学，2010，37（2）：19-22.
[5] 刘艳华，王志德，牟建民，等.烟草种质繁种更新理论与技术[J].植物遗传资源学报，2009，10（4）：618-622.
[6] 许美玲， 贺晓辉， 宋玉川，等. 72份雪茄烟种质资源的鉴定评价和聚类分析[J]. 中国烟草学报， 2017， 23（5）：41-58.
[7] 字学娟，李茂，易克贤.链荚豆种质资源形态特征变异研究[J].广东农业科学，2013，40（13）：29-31，46.
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[9] 许美玲，肖炳光.24份入国家种质库新编目烤烟种质资源的特征特性研究[J].安徽农业科学， 2013，41（17）：7429-7434.
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[11] 王志德，王元英，牟建民.烟草种质资源描述规范和数据标准[S].北京：中国农业出版社，2006.
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[13] 李东亮.基于化学成分的烟草质量评价方法研究与应用[D].郑州：河南农业大学，2008.
[14] 吴斌， 陈德鑫， 余祥文，等. 四川烟草有害生物普查和综合防控技术研究与应用[J]. 中国科技成果， 2017（23）：39-41.
[15] 张振臣，邓海滨，刘琼光，等.广东抗青枯病烟草资源筛选[J].广东农业科学，2014，41（7）：27-29.
[16] 戴培刚，王志德，牟建民，等.部分烟草种质主要病害抗性分析[J].中国烟草科学，2004，25（3）：1-5.
关键词 烟草;种质资源;繁种更新;广东省
中图分类号 S572文献标识码 A
文章编号 0517-6611（2019）16-0033-04
Propagating and Identification for Tobacco Germplasm Resources in Guangdong Province
MA Zhu wen1，2， LI Xiang he1，2， HUANG Zhen rui1，2 et al （1.Crops Research Institute of Guangdong Academy of Agricultural Sciences，Guangzhou，Guangdong 510640;2.Guangdong Provincial Key Laboratory of Crops Genetics and Improvement， Guangzhou， Guangdong 510640）
Abstract Propagating and regeneration for 77 tobacco germplasm resources was carried out in the spring of 2018， including 51 of flue cured tobacco and 26 of air cured tobacco. And the data collection of main characteristics was conducted. The results showed that there were great differences in the growing period duration， morphological characteristics and main agricultural characters among the germplasms. The variable coefficients of the growth periods were 7.4%-17.0%， which were in the order （from high to low） of budding flower open days， flowering period， whole growth period and seedling period. Dapuduoyeyan had the longest whole growth period （197.0 d）， while Maotianzhenxiaojiwei had the shortest growth period （126.0 d） . Variation coefficients of main agronomic characters of different varieties were 11.3%-26.5% ， which were in the order（from high to low） of node interval， leaf length， leaf width， angle between stem and leaf， leaf number， plant height， corolla diameter， calyx length， stem girth， corolla length， angle between main vein and lateral veins. Tobacco mosaic virus （TMV） was the most severe natural disease occurred in the field， followed with bacterial wilt， while cucumber mosaic virus （CMV）， black shank and potato virus Y （PVY） showed sporadic outbreaks. Indcidence rates of Guangyan 127， YK1085， SR1307， Duokang 6 and other 41 germplasm resources were 0， and the rest 22 germplasm resources showed natural diseases in fields in different degrees. Germination rate of 67 tested germplasm resources met the requirements of storage. Key words Tobacco;Germplasm resource;Propagating and regeneration;Guangdong Province
烟草种质资源是烟草遗传理论研究、生物技术研究和烟叶生产的宝贵资源和重要战略物资[1]，是烟草行业可持续发展的物质基础，也是开展培育烟草新品种的前提和保证[2]。广东省的烟草种质资源收集工作始于20世纪50年代初期，经过几代人的不懈努力，目前收集、保存各类烟草种质资源 1 490份，其中广东地方烟草种质资源（农家品种）180余份[3-4]。由于保存的种质资源数量较大，而烟草种质资源主要以种子形态在特定环境中进行保存，一定时间后种子发芽率逐渐下降，如不及时进行更新，最终将丧失活力。为了有效地保护这些种质资源，必须按照计划分年度进行繁种更新，以保证烟草种质的长期保存。刘艳华等[5]系统总结了烟草种质资源长期研究所形成的繁种更新理论与技术。田间鉴定是烟草种质资源繁种更新的主要内容之一，能对繁种更新的种质进行性狀鉴定和相关的理论研究。许美玲等[6]在云南德宏开展72份雪茄烟种质的田间试验筛选出优质抗病的雪茄烟种质资源，明确每份资源的特征特性[7]、使用价值[8]，并有效地加以利用[9-10]。鉴于此，笔者对77份烟草种质资源进行田间鉴定及繁种更新，并对参试种质进行了主要特征特性的数据采集。
1 材料与方法
1.1 试验材料
参试77份烟草材料来自广东省农业科学院作物研究所，其中烤烟51份，晒烟26份（表1）。
1.2 试验方法 试验在广东省农业科学院钟落潭白云试验基地进行。按调制类型分区，设烤烟区和晒烟区，不同调制类型间及试验区周边分别设保护行。各类型间及同一类型内随机排列，单行植，不设重复，行距1.2 m，株距0.5 m，每小区植烟32株。
试验材料采用点穴方式播种，浅水育苗。2018年1月9日播种，3月18日移栽。移栽后及时进行中耕培土，结合小培土和大培土进行施肥，氮磷钾比例1∶1∶2。中心花开放后，每份种质资源选择10株植株套袋，套袋前进行摘花摘果，及时人工抹除腋芽。
1.3 调查项目及方法
生育期按生长情况记载;形态特征通过大田调查记载;主要病害根据田间自然发病情况调查，计算发病率和病情指数;每份种质选择5株有代表性的烟株进行主要农艺性状调查，计算平均值;发芽率测定，每份种质取种子100粒，以培养皿上加一张滤纸为发芽床，培养7 d计算发芽势，14 d计算发芽率，3次重复[11]。
试验数据采用Excel 2016及SPSS 22.0软件进行统计 分析。
2 结果与分析
2.1 参试烟草种质资源的生育期比较
从表2可以看出，参试种质资源的苗龄（烟苗播种至完成第六片真叶生长天数）为53.0～72.0 d，其中河源龙川1125苗龄最短（53.0 d），桐乡烟最长（72.0 d）;移栽至现蕾54.0～96.0 d，其中河源龙川1201为54.0 d，大埔多叶烟为96.0 d;移栽至中心花开放 65.0～102.0 d，其中河源龙川1201为65.0 d，大埔多叶烟为 102.0 d;全生育期126.0～197.0 d，茅天镇小鸡尾生育期最短（126.0 d），大埔多叶烟生育期最长（197.0 d）。移栽—现蕾天数变异系数最大，为17.0%;苗龄变异系数最小，为7.40%，说明移栽至现蕾期能较好区分烟草种质间生育期特征差异，而种质间生育期特征在苗期差异较小。
2.2 参试烟草种质资源的植物学形态特征比较
从表3可以看出，参试77份烟草种质中，烟株株型包括塔形、筒形和橄榄形，其中以塔形为主，占67.5%;叶形包括椭圆形、长椭圆形、宽椭圆形，披针形，其中以长椭圆形为主，占67.5%;叶尖包括急尖、渐尖、尾状，其中以渐尖为主，占53.2%;叶面包括皱、较皱、较平、平，以较平为主、占44.2%。叶色包括深绿、绿、黄绿，其中以绿为主，占76.6%;叶片厚薄包括厚、较厚、较薄、薄，其中以较厚为主，占57.1%;叶片主脉粗细包括粗、中、细，其中以中为主，占51.9%;叶耳包括大、中、小、无，其中以中为主，占36.4%;花序密度包括密集和松散，其中以松散为主，占80.5%;花序形状包括球形、扁球形、倒圆锥形、菱形，其中以菱形为主，占62.3%;蒴果形状包括卵圆形、长卵圆形、圆形，其中以卵圆为主，占67.5%;花色包括深红、红、淡红、白，其中以淡红为主，占63.6%。
2.3 参试烟草种质资源的主要农艺性状比较
参试77份种质的烟株株高为82.0～270.0 cm，均值为174.2 cm;茎围为 6.3～10.1 cm，均值为8.4 cm;节距为2.8～8.1 cm，均值为 4.9 cm;叶数为12.5～48.2片，均值为28.6片;，叶长为44.2～81.1 cm，均值为60.4 cm;叶宽为15.6～36.3cm，均值为 25.3 cm;主侧脉夹角为48.3～76.3°，均值为63.5°;茎叶夹角 38.6°～79.6°，均值为65.1°，花冠长度为3.2～5.4 cm，均值为 4.7 cm;花冠直径为1.8～3.1 cm，均值为2.5 cm;花萼长度为1.2～2.6 cm，均值为1.7cm;变异系数为11.3%～26.5%，其中节距（26.5%）最大，叶长（22.2%）、叶宽（22.1%）次之，而主侧脉夹角变异系数（11.3%）最小。 2.4 参试烟草种质资源的田间自然发病情况比较
参试77份烟草种质中，普通烟草花叶病（TMV）发病率为0～100%、均值为25.00%，病情指数为0～53.2、均值为10.8，其中粤烟134、广烟127、YK1085等22份资源发病率为0，而Va116全部植株发病;黄瓜花叶病（CMV）发病率为0～32.5%、均值为8.5%，病情指数为 0～18.4、均值为4.5;黑胫病发病率为0～ 6.00%、均值为0.8%，病情指数为0～2.4、均值为0.2;马铃薯Y病（PVY）发病率为0～7. 9%，均值为0.16%，病情指数为 0～0.84、均值为0.17;青枯病发病率为0～34.0%、均值为 4.5%，病情指数为0～18.5、均值为1.8。其中，广烟127、YK1085、SR1307、多抗6号等45份资源发病率为0，其余22份资源不同程度发病。
2.5 参试烟草种质资源的种子发芽情况比较
种子发芽率是衡量种子质量的重要指标之一。国内外种质资源库繁殖更新的发芽率標准通常在65%～85%;国际植物遗传资源研究所（IPGRI）推荐发芽率标准为85%或活力下降15%，最低临界值为65%;我国国家农作物种质资源库则以发芽率下降到60%为自花授粉作物（自交系）繁殖更新的临时执行指标[4]。参试77份种质资源的种子发芽势平均为79.6%，发芽率平均为81.8%，其中有67份种质发芽率高于75%，符合烟草种质资源入库标准，10份种质资源仍有待秋烟继续重繁。
3 结论与讨论
该试验通过对参试种质调查和分析表明，参试种质具有丰富的遗传多样性。其中，生育期变异系数由大到小依次为移栽至现蕾天数、移栽至中心花开放天数、全生育期、苗龄;形态特征的差异主要表现在株型、叶形、叶尖、叶耳、叶色、叶片厚薄等;主要农艺性状的差异由大到小依次为节距、叶长、叶宽、茎叶角度、叶数、株高、茎围、花冠长度、花冠直径、花萼长度、主侧脉夹角。
广东省收集和保存的烟草种质资源数量较多，其遗传多样性较丰富，为优良基因性状的挖掘和利用奠定了良好的种质基础。参试种质中，烤烟种质广烟127、Yk1085、粤烟134、黄坑20号及晒烟种质棍子烟、桐乡烟、高要区金利罗新烟的株型和叶形较好、叶片厚薄适中、农艺性状优良，因此可继续进行品质鉴定[12-13]。普通烟草花叶病、青枯病是广东地区烟株常发病害，对烟叶生产危害极大，该试验中广烟127、粤烟134、多抗6号、棍子烟、筑波一号等种质的普通烟草花叶病、青枯病田间自然发病率为0，可进一步开展人工接种鉴定和病圃鉴定[14-16]，从而确定其抗性水平，为抗病育种提供抗源。里姆斯23、G126、Ti165、晋太33、金黄柳-2、阳溪镇大黑烟、务川小团叶子、濯水黑大烟、红丝乡大茄花烟、务川黑烟共10份种质资源仍需秋烟继续重繁。
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