【摘 要】
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谷胱甘肽是广泛存在于生物体内的生物活性三肽化合物,因其具有重要的生理功能而在医药、食品、化妆品等行业有着广泛的应用,该研究克隆了来自Listeria monocytogenes的谷胱甘
【机 构】
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浙江大学化学工程与生物工程学院,浙江杭州,310027;山东金城生物药业有限公司,山东淄博,255129
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谷胱甘肽是广泛存在于生物体内的生物活性三肽化合物,因其具有重要的生理功能而在医药、食品、化妆品等行业有着广泛的应用,该研究克隆了来自Listeria monocytogenes的谷胱甘肽双功能酶基因gshF,以pET28a(+)作为表达载体,利用大肠杆菌实现重组表达,研究表明,重组菌于37℃培养4h后,在28℃下经0.2 mmol/L IPTG诱导表达,胞内酶活可达2 318 U/L.表达产物破胞、离心、亲和层析后,进一步考察了其酶学性质,表明该酶催化最适温度37℃,最适pH 8.5,还研究了Mg2+和ATP对其的影响以及该酶的稳定性.最终通过GshF体外酶催化合成谷胱甘肽,得到的最高产量为2.58 g/L.这些对该酶在谷胱甘肽生物合成上的应用有重要的借鉴作用.
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