新锌指蛋白基因Zfp637真核表达质粒的构建及对乳腺癌EMT6细胞的作用

来源 :四川大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengyuguohou2009
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目的构建锌指蛋白Zfp637真核表达质粒及稳定转染过表达细胞,并观察Zfp637基因对肿瘤细胞生长增殖的影响。方法以正常小鼠脾脏组织eDNA作为模板扩增Zfp637DNA,定向插入到pEGFP—C3真核表达质粒中,酶切片段分析和测序鉴定以确定成功构建pEGFP-Zfp637重组质粒,通过脂质体介导pEGFP—Zfp637重组质粒转染小鼠乳腺癌株EMT6细胞,并且通过G418筛选出稳定转染细胞(Zfp637-EMT6)。荧光显微镜下对Zfp637进行亚细胞定位;RT—PCR检测Zfp637-EMT6细胞中Z
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