重组Kinectin蛋白的表达、纯化及应用研究

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目的优化重组kinectin蛋白的诱导表达及纯化条件;探讨用其致敏的树突状细胞(DC)对自体T淋巴细胞增殖能力的影响。方法以pMAL—C2为载体构建重组质粒,并转入TB1宿主菌。从IPTG加入时机、诱导温度、诱导时间及IPTG浓度方面对工程菌的诱导条件进行优化;过Amylose—resin亲和层析柱对诱导产物进行分离纯化。用获取的MBP—kinectin融合蛋白致敏从人外周血中分离培养的DC,并用ELIsA检测细胞上清液中的IL-12、IFN-γ含量;再用MTT法检测致敏DC刺激白体T淋巴细胞增殖的能力。
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