【摘 要】
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目的 明确冬凌草甲素抑制A549裸鼠移植瘤增殖的机制途径,为冬凌草甲素抗NSCLC的应用提供依据.方法 构建A549裸鼠移植瘤模型,分成稳表达Sema4D的A549细胞过表达组(LV-Sema4D组),DLCJS干预的稳表达细胞给药组(LV-Sema4D+DLCJS组),稳表达阴性对照病毒细胞的阴性对照组(LV-NC组),未转染慢病毒的A549细胞的空白对照组(CON组)等4组.给药4周,观察移植瘤的体积、瘤重改变;qRT-PCR和Western Blot分别检测各组Se-ma4D、PlexinB1、C-
【机 构】
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浙江中医药大学附属宁波中医院,浙江宁波315010
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目的 明确冬凌草甲素抑制A549裸鼠移植瘤增殖的机制途径,为冬凌草甲素抗NSCLC的应用提供依据.方法 构建A549裸鼠移植瘤模型,分成稳表达Sema4D的A549细胞过表达组(LV-Sema4D组),DLCJS干预的稳表达细胞给药组(LV-Sema4D+DLCJS组),稳表达阴性对照病毒细胞的阴性对照组(LV-NC组),未转染慢病毒的A549细胞的空白对照组(CON组)等4组.给药4周,观察移植瘤的体积、瘤重改变;qRT-PCR和Western Blot分别检测各组Se-ma4D、PlexinB1、C-Met的mRNA和蛋白质表达水平;免疫组化检测各组Sema4D、PlexinB1、C-Met的蛋白质表达.观察冬凌草甲素对A549裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨冬凌草甲素抗A549细胞增殖的作用机制.结果 各组瘤重与体积:与CON组相比,LV-NC组的瘤重及体积差异无统计学意义(P＞0.05);与CON组和LV-NC组相比,LV-Sema4D组的瘤重明显增加(P＜0.01),接种后第17、20、24天LV-Sema4D组的瘤体积显著增大(P＜0.05,P＜0.01);与LV-Sema4D组相比,LV-Sema4D+DLCJS组的瘤重及体积显著减小(P＜0.05).qRT-PCR和Western Blot的结果显示:与CON组相比,LV-NC组的Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA及蛋白表达均无显著性差异(P＞0.05).与CON组和LV-NC组相比,LV-Sema4D 组和 LV-Sema4D+DLCJS 组的 Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA 表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01).与 LV-Sema4D 组相比,LV-Sema4D+DLCJS 组的 Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA 表达均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).免疫组化结果显示:与CON组相比,LV-NC组的Sema4D阳性表达率差异无统计学意义(P＞0.05).与CON组和LV-NC组相比,LV-Sema4D组和LV-Sema4D+DLCJS组的Sema4D阳性表达率显著升高(P＜0.01);与LV-Sema4D组相比,LV-Sema4D+DLCJS组的Sema4D阳性表达率显著降低(P＜0.01).结论 冬凌草甲素可使A549裸鼠移植瘤瘤重及体积显著减小,Sema4D、PlexinB1、c-Met的mRNA及蛋白表达显著降低,从而抑制A549细胞增殖,继而发挥抗NSCLC的作用.
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