【摘 要】
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以甘蓝型油菜湘油 1 3号为试验材料 ,运用根癌农杆菌介导法和子房注射法成功地将Bt杀虫蛋白基因导入油菜 .在特定的条件下 ,以子叶柄作为转化受体进行农杆菌介导转化 ,其转化
【机 构】
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湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室!中国湖南长沙410218; 湖南农业大学作?;
【基金项目】
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湖南省科委基金项目!(97JKY1 0 0 5)
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以甘蓝型油菜湘油 1 3号为试验材料 ,运用根癌农杆菌介导法和子房注射法成功地将Bt杀虫蛋白基因导入油菜 .在特定的条件下 ,以子叶柄作为转化受体进行农杆菌介导转化 ,其转化效率受侵染时间和共培养时间的影响 ,最佳侵染时间为 3～ 5min,最佳共培养时间为60～ 72 h;子房注射法的最佳注射时间为授粉后第 2 0～ 30 h,最适注射部位为子房中部 ,DNA注射量为 0 .5～ 1 .5μg.在最佳转化条件下它们分别获得抗卡那霉素植株的频率为 8.3%、1 2 .8% .分子检测实验证明 ,Bt杀虫蛋白基因已整合到油菜基因组中 .农杆菌介导法获得转基因植株的频率为 1 .1 8% ,子房注射法的转化频率为 2 .66% ,可见子房注射法是一种有效、实用的油菜遗传转化方法 .
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