【摘 要】
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为建立提取普洱茶发酵样品中微生物DNA的方法。首先比较了3种发酵样品中菌体收集方法,其次改进了omega小量植物DNA提取试剂盒的提取方法,以DNA的纯度、提取率和细菌16S rDNA
【基金项目】
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国家科技支撑计划项目“云南普洱茶加工关键技术研究与应用”(2007BAD58B02);云南省应用基础研究重点基金项目“普洱茶加工工艺与品质关系研究”(2009CC2005)
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为建立提取普洱茶发酵样品中微生物DNA的方法。首先比较了3种发酵样品中菌体收集方法,其次改进了omega小量植物DNA提取试剂盒的提取方法,以DNA的纯度、提取率和细菌16S rDNA、真菌β-微管蛋白基因PCR扩增为指标,评价提取DNA质量。实验发现茶样(5g)加Tween-NaCl缓冲液(50mL),静置30min,超声波振荡10min,离心(10min,12000r/min)的菌体收集方法和在omega小量植物DNA提取试剂盒中引入液氮研磨、溶菌酶和破壁酶联合裂解细胞的方法提取的DNA纯度好,可以分别扩增出细菌16S rDNA和真菌β-微管蛋白基因。建立了普洱茶发酵样品细菌和真菌DNA同时提取方法,为开展普洱茶固态发酵过程微生物多样性的分子生物学研究奠定了基础。
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