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本文旨在探讨半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)垂体细胞的体外原代培养方法。采用胰蛋白酶消化法,垂体细胞能够在含有5%的胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的L-15完全培养基中,在24℃培养箱中,在不添加细胞生长因子的条件下培养7天以上,并分泌促性腺激素。结果显示,建立的垂体细胞原代培养方法适用于亲鱼和成鱼。体外原代培养的细胞既可以应用其开展相关的生殖生理研究,也可以从细胞层面探讨营养素发挥生殖调控的作用机制,为亲鱼营养调控机制研究提供便捷的实验材料。