【摘 要】
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CRISPR多基因编辑系统在动植物中已被广泛应用。为了在乳腺癌细胞中构建一套多基因编辑系统,利用内源性tRNA自剪切特点,将tRNA与小向导RNA(sgRNA)进行串联组合实现基因编辑,
【机 构】
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江南大学生物工程学院,江南大学医学院
【基金项目】
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江苏省自然科学基金项目(No:BK20161130);江苏省六大人才高峰工程(No.SWYY-128);国家科技重大专项(2018ZX10302205-004-002)
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CRISPR多基因编辑系统在动植物中已被广泛应用。为了在乳腺癌细胞中构建一套多基因编辑系统,利用内源性tRNA自剪切特点,将tRNA与小向导RNA(sgRNA)进行串联组合实现基因编辑,并在MCF7乳腺癌细胞中对KLF4、MYC、SOX2和OCT44个转录因子同时调控,在基因水平、蛋白表达以及功能改变3个层次验证该多基因编辑系统的功能性与可靠性。实验结果显示被调控的转录因子在细胞内的表达量提高2倍以上,侵袭能力明显增强,细胞的存活率提高50%,干细胞比例由2.57%提高到18.5%。同时,该系统在SUM1
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