减毒鼠伤寒沙门氏菌全长hpaA基因工程菌的构建

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jackyray

【摘要】

：

为构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌，并探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体构建H.pylori疫苗株的意义。应用PCR法从H.pyloi基因组DNA中扩增783bp的hpaA基因，经酶切-连接

【作者】

：

朱森林陈洁等

【机构】

：

中山医科大学附属第一医院

【出处】

：

微生物学报

【发表日期】

：

2002年1期

【关键词】

：

幽门螺杆菌 HPAA基因鼠伤寒沙门氏菌减毒疫苗重组基因工程菌 Helicobacter pylori hpaA gene Salmonella ty

【基金项目】

：

卫生部临床学科重点项目 ( 970 4 0 2 2 6 ),,CMBScholarProgram ( 98 6 77),,广东省科技计划重点攻关项目( 99M0 4 80 2G),,广东省自然科学基金课题 ( 990 0 77),,广东省高教厅“千百十工程”优秀人才基金 ( 2 0 0 00 8)~~

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为构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌，并探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体构建H.pylori疫苗株的意义。应用PCR法从H.pyloi基因组DNA中扩增783bp的hpaA基因，经酶切-连接反应将其克隆入原核表达质粒pTrc99A的NcoⅠ-SalⅠ位点，并进行了核苷酸序列测定，重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261，提取重组菌质粒，PCR和酶切鉴定，筛选阳性克隆，用SDS-PAGE电泳和Western blot进行HpaA表达分析和鉴定，用薄层扫描分析HpaA含量，重组菌C57BL/6小鼠喂

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