【摘 要】
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不同H5亚型禽流感(AIV)HA上糖基化位点的分布是不同的,然而不同糖基化位点对病毒的作用仍不十分清楚。本研究利用定点突变和反向遗传操作构建了3个不同糖基化位点单缺失突变
【机 构】
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扬州大学兽医学院 农业部畜禽传染病学重点开放实验室禽类预防医学教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家科技重大专项(2012ZX10004214-001-002);973计划(2011CB505003);江苏省自然科学研究重大项目(10KJA230055);江苏省研究生科研创新计划(CXZZ12_0915);江苏省青蓝工程项目(苏教师[201027号];教育部创新团队项目(IRT0978);江苏省高校优势学科建设工程资助项目;国家自然科学基金项目(31372450)
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不同H5亚型禽流感(AIV)HA上糖基化位点的分布是不同的,然而不同糖基化位点对病毒的作用仍不十分清楚。本研究利用定点突变和反向遗传操作构建了3个不同糖基化位点单缺失突变病毒,并对其增殖特性和毒力进行了测定。结果表明,通过HA基因序列测定和免疫印迹分析证实已成功去除了特定糖基化位点。158位糖基化位点缺失突变株rS△158在鸡胚中的EID50和MDCK细胞上TCID50比野生型rS略低,空斑直径显著减小;而单独去除169位和290位糖基化位点的rS△169和rS△290的EID50和TCID50略高于野生型rS,空斑直径相近,但空斑数要比后者高出10倍以上。所有突变株及野生型病毒在CEF上增殖速率相同,对SPF鸡均是高致病性的。因此,糖基化位点可影响病毒的体外增殖,但结果因细胞而异。
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