【摘 要】
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目的 探讨敲低微小RNA-25(miRNA-25)表达对缺氧/复氧诱导的H9 C2心肌细胞损伤的影响.方法 将预处理的H9 C2心肌细胞分为4组:空白对照组、模型组、阴性组和敲低组.敲低组转染miRNA-25-shRNA干扰质粒0.1μL,空载组转染等量无义干扰序列,空白对照组和模型组分别加入等体积生理盐水.预处理后,除空白对照组外,其他3组细胞构建缺氧/复氧细胞模型.以逆转录-PCR法检测细胞miRNA-25基因表达水平,酶联免疫吸附实验检测培养液乳酸脱氢酶(LDH)水平,CCK-8法检测细胞存活率,流
【机 构】
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内蒙古民族大学 附属医院 蒙医心内科,内蒙古 通辽028000
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目的 探讨敲低微小RNA-25(miRNA-25)表达对缺氧/复氧诱导的H9 C2心肌细胞损伤的影响.方法 将预处理的H9 C2心肌细胞分为4组:空白对照组、模型组、阴性组和敲低组.敲低组转染miRNA-25-shRNA干扰质粒0.1μL,空载组转染等量无义干扰序列,空白对照组和模型组分别加入等体积生理盐水.预处理后,除空白对照组外,其他3组细胞构建缺氧/复氧细胞模型.以逆转录-PCR法检测细胞miRNA-25基因表达水平,酶联免疫吸附实验检测培养液乳酸脱氢酶(LDH)水平,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 空白对照组、模型组、阴性组和敲低组的miRNA-25基因表达水平分别为1.31±0.42,0.82±0.33,0.75±0.24和0.27±0.05;这4组的LDH表达水平分别为(49.73±12.54),(109.78±30.74),(112.85±36.44)和(124.63±40.75)U·L-1;这4组于72 h的细胞存活率分别为(92.73±6.18)％,(31.82±14.56)％,(29.17±13.38)％和(15.45±6.24)％;这4组的细胞凋亡率分别为(2.37±0.58)％,(46.52±13.56)％,(43.27±8.95)％和(72.78±10.62)％.上述指标:模型组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);阴性组、敲低组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);敲低组与阴性组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 敲低miRNA-25表达加剧缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞损伤,可能与加剧细胞炎症反应有关.
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