应用PCR技术扩增大肠杆菌热敏肠毒素基因

来源 :西南农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gwxy110
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以一对合成的特异性寡核苷酸片段为引物,通过聚合酶链式反应(PCR),对不同血清型的ETEC以及104份牛、猪及鸡源大肠杆菌分离物中LT基因片段进行扩增。3株已知血清型ETEC、13份牛源、6份鸡源、10份猪源的大肠杆菌扩增后可见一条314bp的片段,而非ETEC大肠杆菌、沙门氏菌等扩增后未出现这一片段。扩增产物用SmaI酶解为190bp和124bp两个片段。印迹杂交表明,314bp扩增片段及SmaI酶解的124bp和190bp片段均能与特异的LTB基因探针杂交,Dot-印迹杂交与PCR对样品的扩增结果相一致。 Using a pair of synthetic specific oligonucleotide fragments as primers, the LT gene fragments of ETECs with different serotypes and 104 isolates of bovine, porcine and chicken origin were amplified by polymerase chain reaction (PCR) increase. A total of 314bp fragments of 3 Escherichia coli strains of known ETECs, 13 bovine cows, 6 chicken breeders and 10 pig breeders were obtained. However, no such fragment appeared after amplification of ETEC, Salmonella and so on . The amplified product was digested with SmaI into two fragments of 190 bp and 124 bp. Blotting indicated that both the 314bp fragment and the 124bp and 190bp fragments digested by SmaI were able to hybridize with the specific LTB gene probe. The Dot-blot hybridization was consistent with the PCR amplification.
其他文献
寄生人体的环孢子虫(Cyclospora)是一种新发现的球虫。1870年,Eimer首先从鼹鼠的肠道中分离到[1],1881年,Schneider建立环孢子虫属(Cyclospora)[2]。Schaudinn等(1902)对寄生
作者对宁夏区少管所339例违法少年进行调查,其中男333例,女6例。小于10岁者35例(10.3%),11~12岁32例(9.4%),13~15岁272例(80.2%)。自幼生长在农村、农场者194例(57.2%)。初中
为了探讨下丘脑内一氧化氮与应激之间的关系,本实验应用NADPH-d组化法和C-fos免疫组化技术相结合的方法,对束缚应激大鼠下丘脑内一氧化氮合酶(NOS)和c-fos蛋白的分布以及两者的共
本文对吸附澄清技术的作用原理、吸附澄清剂的分类以及近几年天然澄清剂在中药提取精制中的应用等方面进行了介绍。 In this paper, the principle of adsorption and clari
本文回顾了衰老研究中遇到的难题,包括选择模型、区别病理变化与内生的衰老变化、继发变化与原发变化以及对特殊老年变化在衰老中的重要性。综述了以往的研究途径,特别探讨了
自蔓燃高温合成(简称SHS)又称燃烧合成(简称CS),是近年来发展起来的一种材料合成新技术。其特点是利用物质在合成时放出的大量热能自发地促进新物质的高温合成。其工艺过程
研究了国产改性的3种ZSM5分子筛从二氯苯异构体混合液中选择吸附对二氯苯的平衡规律.结果表明,3种分子筛对对二氯苯的选择吸附能力为HZSM5>FeZSM5>LiZSM5,对、邻位DCB单组分的吸附等温线均可用Langmuir模型表
硬化层的特征通常由它的硬度、深度来表征。硬化层材料的微观结构又取决硬化过程。由于硬化层与基体的微观结构不同,也就为超声波测量硬化层的深度提供了条件。本文用超声波的
本文采用微电泳方法观察到在大鼠丘脑腹内侧核(VM),微电泳给予乙酰胆碱(ACH)使所有受试神经元自发放电频率加快,谷氨酸(GLU)使大多数神经元放电加快,它们的作用依赖于电流强度;而γ氨基丁酸(GABA)和
观察抗肝癌中药消结灵对小鼠移植实体型肝癌和S180肉瘤的抑制作用,超微病理改变,免疫组化定位,研究消结灵的抗癌机理。结果:实验组的肿瘤重量明显减轻,抗肝癌抑制率为48%~70%,抗S180肉瘤抑制率为36%~51%。