【摘 要】
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目的 利用“荧光定量PCR溶解曲线分析技术”监测HIV感染者外周血T细胞TCR α链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).方法 提取6例HIV感染者,4例健康者外周血单个核细胞(periphera
【机 构】
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重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016;重庆市疾病预防控制中心,重庆,400042
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目的 利用“荧光定量PCR溶解曲线分析技术”监测HIV感染者外周血T细胞TCR α链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).方法 提取6例HIV感染者,4例健康者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMc)中的总RNA,逆转录成cDNA,设计人32个TRAV基因家族上、下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生.结果 健康者外周血T细胞TCR α链32个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的“溶解曲线谱型图”显示多克隆增生的高斯分布,呈现溶点不同的CDR3多态性,6例HIV感染者的外周血TCR α链CDR3谱系的32个家族CDR3表达频率不一致,患者各家族PCR产物的“溶解曲线谱型图”显示多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族.结论 荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR α链CDR3谱系漂移的方法稳定、简便,可以用来监测健康者和HIV感染者外周血T细胞TCR α链CDR3谱系漂移.
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