【摘 要】
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目的观察A型肉毒毒素(BoNT-A)关节腔注射对佐剂性关节炎疼痛大鼠镇痛效果与背根神经节(DRG)中降钙素基因相关肽(CGRP)表达的关系，并检测其逆向轴浆运输的情况。方法SD大鼠90只按随机数字表法分为A、B、C、D和E五组，每组18只大鼠。分组后A组注射50 μL生理盐水作为对照组，而B、C、D、E组大鼠左后肢踝关节腔注射50 μL完全弗氏佐剂(CFA)建立佐剂性关节炎疼痛模型作为模型组。建模
【机 构】
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266021 青岛，青岛大学附属医院康复二科,青岛市立医院药剂科,日照市人民医院康复科,266021 青岛，青岛大学附属医院康复二科,266021 青岛，青岛大学附属医院康复二科,266021 青岛，
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目的观察A型肉毒毒素(BoNT-A)关节腔注射对佐剂性关节炎疼痛大鼠镇痛效果与背根神经节(DRG)中降钙素基因相关肽(CGRP)表达的关系，并检测其逆向轴浆运输的情况。
方法SD大鼠90只按随机数字表法分为A、B、C、D和E五组，每组18只大鼠。分组后A组注射50 μL生理盐水作为对照组，而B、C、D、E组大鼠左后肢踝关节腔注射50 μL完全弗氏佐剂(CFA)建立佐剂性关节炎疼痛模型作为模型组。建模3周关节炎疼痛模型逐渐稳定后，A组和B组大鼠关节腔内注射20 μL生理盐水，而C、D和E组大鼠关节腔内注射不同剂量20 μL的BoNT-A，即A组为对照组＋关节腔内注射20 μL生理盐水；B组为模型组＋关节腔内注射20 μL生理盐水；C组为模型组＋关节腔内注射1 U的20 μL BoNT-A；D组为模型组＋关节腔内注射3 U的20 μL BoNT-A；E组为模型组＋关节腔内注射10 U的20 μL BoNT-A 。分别于造模前、造模后1、5、14和21 d和给药后1、3、5和14 d，对各组大鼠进行机械痛阈和肌力评分测试；应用免疫印迹和免疫荧光法观察DRG中CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数变化，以及观察BoNT-A的水解产物裂解的突出相关蛋白-25 kDa(cl-SNAP-25)是否存在于DRG中。
结果与A组相比，B、C、D、E组大鼠的机械痛阈值和肌力评分均显著降低(P<0.001)，大鼠DRG中的CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数均显著增加(P<0.001)；与B组相比，BoNT-A注射5 d后D组和E组大鼠的机械痛阈显著提高(P<0.001)，而14 d后C组的机械痛阈亦显著提高(P<0.01)；BoNT-A注射3 d后，D组和E组大鼠DRG中的CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数显著降低(P<0.01)，C组14 d后DRG中的CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数显著降低(P<0.01)；D组与E组相比，机械痛阈、CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数组间差异均无统计学意义(P>0.05)；与B组相比，C组和D组肌力评分组间差异均无统计学意义(P>0.05)；E组BoNT-A注射5 d后，肌力评分显著下降(P<0.001)；免疫荧光检测到DRG中存在cl-SNAP-25。
结论BoNT-A通过减少DRG中CGRP的表达，减轻关节炎疼痛且存在剂量依赖性；BoNT-A可以通过逆向轴浆运输到达DRG。
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