快速诊断性DNA测序法鉴定致病性猪链球菌

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目的 尝试将诊断性DNA测序方法优化后用于猪链球菌的快速鉴定.方法 5个来源于临床感染病例的可疑猪链球菌分离株,用诊断性PCR产物直接测序法分析其基因组上的16S rRNA,cps2J和mrp 3个特征性靶基因的DNA序列;并对整个技术流程进行优化改进,缩短获得结果的时间.结果 获得了5个可疑猪链球菌菌株的3个靶基因片段的DNA碱基序列;这5个菌株被扩增检测的基因区域,有相同的16S rRNS、cps2J和mrp基因片段,长度分别为336、437、520bp;将这3个靶基因片段序列上栽到NCBI-BLAsT服务器,与GenBank核酸序列数据库的已知序列进行比对分析,结果显示,该5个可疑茵株的被分析的3个靶基因片段与猪链球菌2型的同源性最高.优化后的方法在得到经过适当培养的纯茵后,在不超过7~8 h内,就可以获得靶基因片段的DNA测序结果.结论 该5个来源于临床感染病例的可疑茵株为血清2型猪链球菌;经优化改进的诊断性DNA测序方法可用于猪链球菌的快速鉴定.
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