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结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合蛋白稳定表达细胞系的建立

来源 :科学技术与工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wws5245

【摘 要】

：

建立了能够稳定表达结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合蛋白的P815细胞系。将Ag85B和ESAT6基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3，构建了Ag85B—ESAT6融合蛋白的真核表达质粒Ag85B-pcDNA

【作 者】

：

师长宏 安家泽 唐小凤 王晓武 张海 柏银兰 徐志凯 

【机 构】

：

第四军医大学实验动物研究中心,第四军医大学西京医院肝胆外科,第四军医大学基础部微生物学教研室

【出 处】

：

科学技术与工程

【发表日期】

：

2006年6期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 细胞系 AG85B ESAT6 基因融合 Mycobacterium tuberculosis  cell line  Ag85B  EAST6 

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30400381）资助

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建立了能够稳定表达结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合蛋白的P815细胞系。将Ag85B和ESAT6基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3，构建了Ag85B—ESAT6融合蛋白的真核表达质粒Ag85B-pcDNA3-ESAT6。在阳离子聚合物作用下，重组质粒转染与BALB／c遗传背景一致的P815（H-2^4）细胞。通过G418压力筛选后，得到1株阳性克隆细胞。经过RT-PCR检测到该细胞中有Ag85B-ESAT6融合蛋白mRNA表达，用间接免疫荧光可以在转染重组质粒的P815细胞膜上检测到较强的绿色荧

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