【摘 要】
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目的: 构建藏族外周血淋巴细胞全长cDNA文库并鉴定其质量.方法: 分离健康藏族人外周血液的淋巴细胞并提取总RNA, 利用SMART(switching mechanism at 5′ end of RNA transcri
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目的: 构建藏族外周血淋巴细胞全长cDNA文库并鉴定其质量.方法: 分离健康藏族人外周血液的淋巴细胞并提取总RNA, 利用SMART(switching mechanism at 5′ end of RNA transcript)技术, 构建全长cDNA文库并进行文库滴度和重组率的测定.扩增文库并随机挑取噬菌斑进行PCR鉴定插入片段的大小.结果: 构建的cDNA文库的滴度为1.8×109pfu/L, 重组率>98%, 文库扩增后的滴度达8×1012pfu/L, 插入片段的长度在0.75～2.0 kb之间, 平均长度为1.35 kb.结论: 构建的藏族外周血淋巴细胞cDNA文库具有很高的质量, 为进一步筛选、克隆藏族低氧反应相关基因奠定坚实的基础.
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