【摘 要】
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建立了一种高通量液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测干血点(DBS)样品中尿酸(UA)的方法。采用自动液体操作平台对样品进行高通量自动化前处理,首先用含有UA-1,3-15 N2稳定同位
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建立了一种高通量液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测干血点(DBS)样品中尿酸(UA)的方法。采用自动液体操作平台对样品进行高通量自动化前处理,首先用含有UA-1,3-15 N2稳定同位素内标的Tris水溶液进行萃取,然后用含有0.1%甲酸、0.05%三氟乙酸的乙腈溶液沉淀蛋白质。处理后的样品经CN色谱柱分离,多反应监测(MRM)模式进行LC-MS/MS分析。结果表明,在DBS样品中,UA在7.8~1 000μmol/L浓度范围内的线性关系良好(R2=0.999);检出限为3.1μmol/L(S/N=3);定量限为12.5μmol/L(S/N=10);平均回收率为95%~101%;日内相对标准偏差(RSD)为4.2%~12%;日间RSD为5.3%~14%。以样品中UA检测结果的总体RSD不超过15%来考察样品稳定性,分别将样品在-20℃保持30天、在37℃保持7天、反复冻融5次,样品中UA检测结果总体RSD小于10%,表明样品稳定性良好。将该方法与传统生化分析方法相比较,并分析了204份血样,相关性较好(R2=0.946)。此方法可为有限采血条件下UA的检测及UA相关疾病的大规模筛查提供新途径。
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