【摘 要】
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采用磁性纳米颗粒对NMN(烟酰胺单核苷酸)转移酶和乙醇脱氢酶进行共价共固定,用以生产NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),并对共固定化条件、共固定化双酶酶学性质及其动力学进行了
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采用磁性纳米颗粒对NMN(烟酰胺单核苷酸)转移酶和乙醇脱氢酶进行共价共固定,用以生产NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),并对共固定化条件、共固定化双酶酶学性质及其动力学进行了研究。实验结果显示,双酶最佳共固定化反应条件为:NMN转移酶和乙醇脱氢酶添加量分别为13 U/mg和20.6 U/mg,体系pH控制在5.0~7.0,25℃固定化2h,NADH产率可达到87%,与游离酶73%的催化效率相比提高了14%。所得共固定化双酶在连续使用11次后,剩余酶活仍保留在61.1%左右,表明共固定化酶具有较好的操作稳定性。双酶动力方程推导与验证结果表明:共固定化双酶反应体系符合米氏方程,其动力学反应速率取决于固定化乙醇脱氢酶的反应速率。
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