hIAP-2 siRNA表达质粒的构建及其对乳腺癌细胞MCF-7的作用

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目的:构建人凋亡抑制蛋白2(hIAP-2)基因的小分子干扰RNA(siRNA)的表达质粒,并检测其对乳腺癌细胞MCF-7的作用。方法:利用含u6启动子的mU6pro载体构建hIAP-2siRNA表达质粒,RT—PCR和Western印迹法检验其对MCF-7细胞的RNA干扰(RNAi)效果。用MTT法分析其对细胞增殖,流式细胞仪检测其对细胞周期,以及Hoeehst染色法观察其对细胞形态的影响。同时,用胱天蛋白酶3(easpase-3)Ae—DEVD-pNA底物法检测easpase-3活性的变化,Wester
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