【摘 要】
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背景与目的nm23-H1基因是一个肿瘤转移抑制基因,但关于nm23-H1基因抑制肿瘤转移的生化机理目前并不清楚。该实验目的就是构建nm23-H1野生型和P96S、H118F突变型原核表达载体,
【机 构】
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天津医科大学总医院天津市肺癌研究所,四川大学华西医院肺癌分子生物学重点实验室,第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心
【基金项目】
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本研究受国家自然科学基金重点项目（No.30430300）、国家自然科学基金（No.30070333）、高等学校博士学科点专项基金（No.20040610060）和国家“十一五”科技攻关项目（No.2006BAI02A01）资助
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背景与目的nm23-H1基因是一个肿瘤转移抑制基因,但关于nm23-H1基因抑制肿瘤转移的生化机理目前并不清楚。该实验目的就是构建nm23-H1野生型和P96S、H118F突变型原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化。方法通过PCR方法扩增野生型和突变型nm23-H1目的片断,利用基因重组技术构建pET28a-nm23-H1野生型和突变型原核表达载体,并进行酶切和测序鉴定,鉴定正确克隆转化BL21（DE3）溶源菌,进行蛋白表达及可溶性分析,同时采用镍柱亲和层析法进行纯化,应用Western blot方法对
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