酶联免疫吸附法测定红细胞内多聚谷氨酸化甲氨蝶呤浓度的方法建立及其初步应用

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目的建立检测红细胞内多聚谷氨酸化甲氨蝶呤(methotrexate polyglutamates,MTXPG)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)方法。方法将含有MTXPG的红细胞采用冻融法、化学裂解法、酶法、超声破碎法等方法裂解,加入血清与裂解液在抗坏血酸、巯基乙醇保护液作用下将MTXPG转化为甲氨蝶呤(methotrexate,MTX),转化液采用高氯酸、三氯乙酸及饱和硫酸铵溶液沉淀蛋白,最后将溶液p H值调整为3.0~9.0,采用ELISA检测MTX浓度。经方法学考核后,检测临床标本对方法准确性进行评
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