pHCN4-DsRed Express2慢病毒载体的构建和鉴定

来源 :中国心血管病研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sfeixxx

【摘要】

：

目的构建超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型4启动子（HCN4）重组慢病毒载体并进行鉴定。方法采用Gateway克隆技术，通过attBxattP反应，构建穿梭质粒pup—HCN4，而后将pLV／Des2-

【作者】

：

李颖高飞蔡军秦选光

【机构】

：

首都医科大学附属北京朝阳医院儿科

【出处】

：

中国心血管病研究杂志

【发表日期】

：

2010年8期

【关键词】

：

HCN4 慢病毒载体 Gateway克隆技术 HCN4 Lentivirus Gateway clone technology

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目的构建超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型4启动子（HCN4）重组慢病毒载体并进行鉴定。方法采用Gateway克隆技术，通过attBxattP反应，构建穿梭质粒pup—HCN4，而后将pLV／Des2-Puro、pUP—HCN4、pDown—DsRed Express2三个质粒通过attLxattR反应，构建成pLV／EXPN2-Puro-HCN4-DsRed Express2质粒，再转染感受态细胞stb13，孵育扩增，离心纯化。采用PCR方法对重组慢病毒载体进行鉴定。结果基于位点特异性重组原理，应

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