【摘 要】
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目的:观察红芪多糖对SCL-1细胞凋亡的调控作用,并探究其作用机制.方法:红芪多糖(25、50、100μg/mL)处理SCL-1细胞,0μg/mL红芪多糖处理的SCL-1细胞设为对照组;细胞计数法(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素-碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞增殖抑制率、细胞凋亡率,筛选50μg/mL浓度为红芪多糖最适浓度.JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位,蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞中分裂的多聚DNA核糖聚合酶(Cleaved PARP)、Cleaved半胱氨
【机 构】
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四川省遂宁市中心医院皮肤科, 四川 遂宁 629000
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目的:观察红芪多糖对SCL-1细胞凋亡的调控作用,并探究其作用机制.方法:红芪多糖(25、50、100μg/mL)处理SCL-1细胞,0μg/mL红芪多糖处理的SCL-1细胞设为对照组;细胞计数法(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素-碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞增殖抑制率、细胞凋亡率,筛选50μg/mL浓度为红芪多糖最适浓度.JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位,蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞中分裂的多聚DNA核糖聚合酶(Cleaved PARP)、Cleaved半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Cleaved Caspase-9及细胞浆、线粒体中细胞色素C(Cytochrome c)、第二个线粒体衍生的caspases激活剂(Smac)、B细胞淋巴瘤/白血病2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病2家族促凋亡基因(Bak)的蛋白表达.结果:与对照组相比,红芪多糖(25、50、100μg/mL)组SCL-1细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),确定50μg/mL红芪多糖为最适浓度.与对照组相比,红芪多糖组SCL-1细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.05),线粒体凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9表达显著升高(P<0.05),线粒体释放Cytochrome c、Smac蛋白表达显著升高(P<0.05),线粒体Bax、Bak蛋白表达显著升高(P<0.05).结论:红芪多糖促进皮肤鳞癌细胞SCL-1凋亡,其机制为激活线粒体途径.
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