玉米根部酵母双杂交cDNA文库的构建及评价

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从玉米各生长时期的根部中提取总RNA后,再利用磁珠法从中分离纯化出mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶作用下,通过长距离PCR,扩增双链cDNA(ds cDNA)。利用SMART技术,通过同源重组的方法,在酵母菌株AH109中构建了玉米根部全长cDNA文库。经检测,文库的转化率为1.76×10^7转化子/3μg pGADT7-Rec,文库滴度为1.17×10^6pfu/mL,重组率为95%。
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