GLP-1R激动剂的细胞筛选模型的建立

来源 :沈阳药科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:majian198522
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目的构建靶向GLP-1R的高通量筛选模型。方法构建过表达GLP-1R的重组质粒和响应GLP-1信号通路的报告载体,共转染到HEK293细胞中,筛选得到稳定转染的单克隆细胞株,并用阳性药进行模型验证。结果成功构建了表达GLP-1R的重组质粒pcDNA3.1(+)-HuGLP-1R和响应GLP-1信号通路的报告载体PGL4.22-CRE-vip-GFP,共转染到HEK293细胞,筛选得到稳定转染细胞株CG-HEK293,经GLP-1刺激后,确定GFP的最佳表达时间为8 h,经过不同浓度的GLP-1刺激后,能够剂量依赖性地激活GFP的表达。结论构建了靶向GLP-1R的高通量筛选模型,该模型能够直观、稳定、高通量的筛选靶向GLP-1R的小分子或者GLP-1类似物,为长效的GLP-1类似物的研究和开发奠定了基础。
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