应用改建的人5型腺病毒载体表达成人腹泻轮状病毒第5基因编码的内壳蛋白

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gianfranco1
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应用前期工作克隆的腺病毒晚期表达盒对引进的5型腺病毒(Adenovirus type 5,Ad5)载体进行改建,首先将成人腹泻轮状病毒(Adult Diarrhea rotavirus,ADRV)第5基因克隆入表达盒中,而后将该表达盒插入到Ad5载体的E3区,最后重组质粒与Ad5 DNA EcoR Ⅰ大片段共转染A549细胞,经打点杂交和Southern转印筛选出重组病毒空斑。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组病毒感染细胞上清和沉淀的抗原滴度分别为1∶8,1∶64。Western转印显示在分子量44 000处有一条转印带。ADRV第5基因在改建的Ad5载体上的表达为口服腺病毒基因工程疫苗的研究积累了实验经验,为ADRV诊断试剂的研制提供了便利条件。

其他文献
利用聚合酶链反应(PCR)技术对丙型肝炎病毒(HCV)的5′-非编码区(5′-NCR)、C及NS4基因区的3对引物分别及同时扩增,检测80例抗-HCV阳性患者的血清HCV RNA,并进行了HCV基因分型研究。各不同引物所介导的PCR检出HCV RNA的结果为:5′- NCR基因区60%(48/80),C基因区37%(30/80),NS4基因区30%(24/80)。以上3对引物同时扩增仅42%(34