【摘 要】
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目的 探讨骨髓间充质干细胞是否通过抑制破骨相关因子改善膝关节骨性关节炎.方法 将40只健康SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组和骨髓间充质干细胞组,每组8只,剩余8只用于骨髓间充质干细胞的分离.除空白组外,其余组采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝关节骨性关节炎大鼠模型.造模成功后第2天起空白组和模型组大鼠膝关节腔注射生理盐水0.3 ml;甲氨蝶呤组大鼠腹腔注射甲氨蝶呤(0.5 mg/kg);骨髓间充质干细胞组大鼠膝关节腔内一次性注射骨髓间充质干细胞0.3 ml,同时每周1次膝关节腔内注射生理盐水
【机 构】
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青海大学附属医院关节外科,西宁810000
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目的 探讨骨髓间充质干细胞是否通过抑制破骨相关因子改善膝关节骨性关节炎.方法 将40只健康SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组和骨髓间充质干细胞组,每组8只,剩余8只用于骨髓间充质干细胞的分离.除空白组外,其余组采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝关节骨性关节炎大鼠模型.造模成功后第2天起空白组和模型组大鼠膝关节腔注射生理盐水0.3 ml;甲氨蝶呤组大鼠腹腔注射甲氨蝶呤(0.5 mg/kg);骨髓间充质干细胞组大鼠膝关节腔内一次性注射骨髓间充质干细胞0.3 ml,同时每周1次膝关节腔内注射生理盐水0.3 ml,每周1次,共4次.4次干预结束后各组大鼠进行关节指数(AI)评分;苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清RANKL、OPG、CXCL10含量;实时荧光定量(qRT-PCR)检测软骨组织RANKL、OPG、TRAF6、CXCL10、CXCR3 mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测软骨组织RANKL、OPG、TRAF6、CXCL10、CXCR3蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠AI评分,血清RANKL、OPG、CXCL10含量,软骨组织RANKL、OPG、TRAF6、CXCL10、CXCR3 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05).与模型组比较,甲氨蝶呤组大鼠AI评分、血清OPG、CXCL10含量及软骨组织TRAF6、CXCL10、CXCR3蛋白表达明显降低(P<0.05);骨髓间充质干细胞组大鼠AI评分、血清RANKL、OPG、CXCL10含量、软骨组织RANKL、OPG、TRAF6、CXCL10、CXCR3mRNA和蛋白表达明显降低(P0.05).结论 骨髓间充质干细胞明显改善膝关节骨性关节炎病理损伤,作用效果与甲氨蝶呤作用效果相当,可能通过调节RANKL/OPG/TRAF6信号通路发挥对膝关节骨性关节炎大鼠的治疗作用.
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