【摘 要】
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目的利用miniSOG标签观察鼻病毒非结构蛋白2B蛋白在细胞中定位及自噬体产生。方法将非结构蛋白2B和miniSOG进行融合表达构建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag质粒，将质粒转染HEK293细胞，在荧光显微镜下，2B-miniSOG阳性细胞进行固定、光氧化及超薄切片制备，电镜下观察2B-miniSOG蛋白在细胞中的定位及细胞超微结构变化，Western blot(WB)检测LC3
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室，北京 100052,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室，北京 100052,中国疾病预防控制中心病毒
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目的利用miniSOG标签观察鼻病毒非结构蛋白2B蛋白在细胞中定位及自噬体产生。
方法将非结构蛋白2B和miniSOG进行融合表达构建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag质粒，将质粒转染HEK293细胞，在荧光显微镜下，2B-miniSOG阳性细胞进行固定、光氧化及超薄切片制备，电镜下观察2B-miniSOG蛋白在细胞中的定位及细胞超微结构变化，Western blot(WB)检测LC3的表达。
结果2B-miniSOG蛋白在荧光显微镜下发出绿色荧光，WB检出自噬标志性蛋白LC3－II表达增加。电镜下观察到蛋白定位于线粒体，细胞中出现大量囊泡样结构，可观察到自噬体和自噬溶酶体。
结论鼻病毒非结构蛋白2B可引起细胞自噬发生。
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