论文部分内容阅读
目的：获得纯化的人细胞核自身抗原精子蛋白（hNASP）及其多克隆抗体,为其功能研究做准备.方法：提取人睾丸组织总RNA,用自行设计的引物,PCR扩增hNASP的一段序列,PCR产物经TA克隆后,通过BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切克隆到pET-28a（＋）中.在E.coli BL21中,用异丙基-β-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达His融合蛋白.样品超声处理后,经镍离子亲和树脂进行亲和层析纯化.用纯化的重组蛋白免疫家兔获取多克隆抗体.结果：对表达重组蛋白的质粒进行DNA测序以及表达的重组蛋白经过十二烷基硫