目的:观察不同保存方法及保存时间对羊膜活性的影响.方法:取健康剖宫产产妇胎盘,剥离其羊膜,分成2.5×2.5cm2小块,随机分成四组,每组8块,按四种不同方法保存.保存1、3个月后分别取羊膜行光镜、电镜、酶组织化学[乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)]及免疫组织化学[碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]观察,并与新鲜羊膜对比.结果:①光镜下,甘油4℃保存1、3个月羊膜上皮层结构破坏明显;DMEM:甘油-70℃保存1、3个月羊膜组织结构基本完整;简化二、一步深低温保存1、3个月的羊膜上皮形态完好.②电镜下,甘油4℃保存1、3个月上皮细胞破坏明显;DMEM:甘油-70℃保存1、3个月羊膜上皮细胞线粒体肿胀,部分细胞核染色质边集;简化二、一步深低温保存1、3个月部分线粒体肿胀.细胞核变化不明显.③甘油4℃、DMEM:甘油-70℃保存法保存1、3个月羊膜上皮细胞SDH、LDH活性与对照组相比差别有极显著性(P＜0.001),保存3个月与保存1个月之间差别有极显著性(P＜0.001);简化二、一步深低温保存1、3个月的两种酶活性与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).④bFGF分布于羊膜上皮和基质层.甘油4℃和DMEM:甘油-70℃保存1、3个月bFGF在上皮层的表达与对照组相比差别有极显著性(P＜0.001),保存3个月与保存1个月之间差别有极显著性(P＜0.001).简化二、一步深低温保存1、3个月其表达与在新鲜羊膜中的表达无显著性差异(P＞0.05),这两种方法之间也无显著性差异(P＞0.05). 结论:甘油4℃和DMEM:甘油-70℃保存的羊膜活性下降,并随保存时间的延长活性明显下降.简化二、一步深低温保存的羊膜能长期保持活性.简化一步深低温保存法方法简便,更适用于羊膜的保存.