【摘 要】
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目的 探讨PR结构域蛋白5(PRDM5)过表达对人急性髓系白血病(AML)细胞系U937迁移侵袭的影响及其机制.方法 收集20例AML患者(AML组)和20例健康志愿者(正常组),采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT?qPCR)检测其骨髓样本中微小RNA(miR)?489?3p和PRDM5 mRNA表达水平.采用脂质体转染技术将人AML细胞系U937分为7组:pcDNA3.1组、pcDNA3.1?PRDM5组、shNC组、shPRDM5组、NC组、miR?489?3p mimics组和miR?489?3p+
【机 构】
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210048 南京,南京江北人民医院血液科
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目的 探讨PR结构域蛋白5(PRDM5)过表达对人急性髓系白血病(AML)细胞系U937迁移侵袭的影响及其机制.方法 收集20例AML患者(AML组)和20例健康志愿者(正常组),采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT?qPCR)检测其骨髓样本中微小RNA(miR)?489?3p和PRDM5 mRNA表达水平.采用脂质体转染技术将人AML细胞系U937分为7组:pcDNA3.1组、pcDNA3.1?PRDM5组、shNC组、shPRDM5组、NC组、miR?489?3p mimics组和miR?489?3p+pcDNA3.1?PRDM5组,采用划痕实验和侵袭迁移小室(Transwell小室)法分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测β?catenin和GSK3β蛋白表达水平.结果 AML组受试者骨髓miR?489?3p表达水平低于正常组,PRDM5 mRNA表达水平高于正常组(P<0.05).pcDNA3.1?PRDM5组和miR?489?3p+pcDNA3.1?PRDM5组PRDM5 mRNA、β?catenin表达水平、穿过基质胶膜的细胞数量及24 h内迁移率分别高于pcDNA3.1组、miR?489?3p mimics组,而GSK3β表达水平分别低于pcDNA3.1组、miR?489?3p mimics组(P<0.05).shPRDM5组和miR?489?3p mimics组的PRDM5 mRNA、β?catenin表达水平、穿过基质胶膜的细胞数量及24 h内迁移率分别低于shNC组和NC组,而GSK3β 蛋白表达水平分别高于shNC组和NC组(P<0.05).结论 miR?489?3p靶向PRDM5基因阻断Wnt/β?catenin信号通路,从而抑制人AML细胞系U937迁移侵袭.
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