人TβRⅡ-ⅠgG1Fc融合基因重组腺病毒载体的构建

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjtwwf
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目的构建含有人TGF-βRⅡ型受体胞外区及ⅠgG1Fc段融合基因的腺病毒载体,并进行初步的功能活性鉴定。方法RT-PCR扩增人TGF-β1Ⅱ型受体胞外区及IgG1Fc段基因。通过Overlap PCR融合为目的基因hTTβRⅡ-ⅠgG1Fc;克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒.线性化后转染含骨架质粒的BJ5183菌.同源重组构建腺病毒质粒;将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞,并扩增、纯化、RT-PCR鉴定;ELISA初步检测重组腺病毒的功能活性。结果目的基因经酶切分析、测序鉴定正确;RT—PCR及
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