研究镍冶炼烟尘对NIH/3T3细胞bcl-2和bax蛋白表达水平的影响。
方法取生长对数期的NIH/3T3细胞,置于镍冶炼烟尘浓度分别为0、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 μg/ml的培养液中培养24 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞LDH活力、Hoechst33342法观察细胞凋亡形态学改变以及蛋白免疫印迹法(western blot)检测NIH/3T3细胞bcl-2和bax蛋白表达水平。
结果与对照组比较,各时点各染毒组细胞相对存活率明显降低,除作用7 d 6.25 μg/ml染毒组外,差异均有统计学意义(P<0.05)。胞外LDH活力随染毒浓度的增加而升高,各染毒组胞外LDH活力明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经100.00 μg/ml镍冶炼烟尘作用24 h细胞呈现染色质浓缩、细胞体积缩小等凋亡早期形态学特征。6.25、12.50、25.00μg/ml染毒组细胞bcl-2蛋白表达分别为0.58±0.01,0.63±0.01, 0.57±0.01,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),50.00、100.00 μg/ml染毒组细胞bcl-2蛋白表达分别为0.35±0.01,0.27±0.01,均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。6.25μg/ml染毒组细胞bax蛋白表达量为0.58±0.00,明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),50.00、100.00 μg/ml染毒组bax蛋白表达量分别为0.71±0.01,0.78±0.02,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论NIH/3T3细胞暴露镍冶炼烟尘24h后能够引起细胞凋亡的启动,并且氧化应激可能诱导其凋亡的发生。