探讨枸橼酸咖啡因对出生后感染所致2日龄新生大鼠脑白质损伤的保护作用。
方法将48只2日龄新生SD大鼠采用随机数字表法随机分为对照组(A组)、脂多糖(LPS)感染组(B组)、枸橼酸咖啡因干预组(C组),每组16只。B、C 2组新生大鼠于2日龄时连续5 d给予0.6 mg/kg LPS腹腔注射,A组连续5 d给予等体积的9 g/L盐水腹腔注射;4日龄时,C组连续7 d另给予10 mg/kg枸橼酸咖啡因腹腔注射,同时A组和B组连续7 d另给予等体积的9 g/L盐水腹腔注射。至12日龄时,3组均采用随机数字表法随机抽取8只处死,免疫组织化学法检测皮质下白质髓鞘碱性蛋白(MBP)表达情况;各组剩余8只大鼠于冰面上迅速取出左右海马组织并保存,左侧海马组织采用Western blot法检测MBP及Caspase-3的表达,右侧海马组织采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测MBP及Caspase-3的表达。
结果A组、B组、C组皮质下MBP阳性表达的积分光密度值(IOD)分别为132.64±1.94、102.43±2.12、114.25±2.04,组间比较差异有统计学意义(F=22.912,P<0.05)。3组海马区MBP mRNA的相对表达水平分别为0.79±0.01、0.39±0.03、0.55±0.02,组间比较差异有统计学意义(F=18.584,P<0.05);3组海马区MBP蛋白的相对表达水平分别为0.64±0.03、0.31±0.03、0.51±0.05,组间比较差异有统计学意义(F=25.780,P<0.05)。3组Caspase-3 mRNA的相对表达量分别为0.34±0.02、0.74±0.03、0.57±0.04,组间比较差异有统计学意义(F=6.105,P<0.05);3组Caspase-3蛋白的相对表达量分别为0.11±0.03、0.36±0.02、0.23±0.03,组间比较差异有统计学意义(F=40.541,P<0.05)。
结论枸橼酸咖啡因对感染所致2日龄新生大鼠脑白质损伤可能具有保护作用,其机制之一可能与抑制炎性反应、减少细胞凋亡有关。