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目的
观察microRNA-10a(miR-10a)对人宫颈癌细胞株顺铂(DDP,Cisplatin)耐药性的影响。
方法分别将miR-10a模拟物(miR-10a mimic)及阴性对照(mimic nc)转染Hela、Siha细胞,并检测转染后细胞的增殖情况及凋亡率;双荧光素酶报告基因实验结果提示miR-10a的靶基因PTEN,并检测转染前后PTEN基因mRNA和蛋白水平的表达差异。
结果⑴miR-10a mimic组与对照组相比:Hela细胞与Siha细胞的DDP半数抑制浓度(IC50),差异均有统计学意义(7.2 μg/ml vs 5.6 μg/ml,6.4 μg/ml vs 3.8 μg/ml,P<0.05)。⑵Hela细胞及Siha细胞实验组凋亡率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。⑶miR-10a能直接作用于PTEN靶基因3′-端非翻译区(3′-UTR),上调miR-10a表达致使耐药相关靶基因PTEN蛋白水平表达降低。
结论miR-10a可能是通过抑制靶基因PTEN蛋白表达从而增加宫颈癌细胞对DDP的耐药性。