【摘 要】
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饲料用酶在饲喂过程中,不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响,因此,饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bac
【机 构】
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暨南大学生物医药研究院;暨南大学微生物技术研究所;暨南大学生物工程系;
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)(2013AA102801);广东省省级科技计划项目(2013B090600141)资助项目
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饲料用酶在饲喂过程中,不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响,因此,饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168β-1,4-内切木聚糖酶（Xyn A）的胰蛋白酶抗性进行理性设计,最终得到三个突变体——Xyn AR121C、Xyn AR121C/K98Q和Xyn AK39I。酶学性质分析显示Xyn AR121C和Xyn AR121C/K98Q与野生型（Xyn A）的最适反应温度均为60℃,Xyn AK39I为40℃;突变体酶与野生型酶的最适p H都是6.0;人工肠液（p H 6.8,10 mg/ml胰蛋白酶溶液）处理野生型及其突变体后,Xyn AR121C/K98Q和Xyn AR121C的残留酶活力均明显比野生型高,它们的半衰期分别是野生型的2.02倍和1.52倍,Xyn AK39I在胰蛋白酶溶液中的半衰期为90min,比野生型缩短了37 min。
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