【摘 要】
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目的:探索聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)修饰的氢氧化铝纳米颗粒(HS)增强树突状细胞(dendritic cell,DC)抗原提呈的作用及其机制.方法:DC负载PEI修饰前后的HS联合卵清蛋白(ovalbum,OVA)抗原后与B3Z细胞共孵育,CPRG(chlorophenol red-β-d-galactopyranoside)方法检测DC对OVA的抗原提呈能力,Western blot检测DC中泛素化OVA蛋白的表达;以不同刺激剂[干扰素(interferon,IFN)-α、R
【机 构】
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南京中医药大学医学院整合医学学院病理学与病理生理学系,江苏南京210023;南京医科大学附属儿童医院血液肿瘤科,江苏南京210008
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目的:探索聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)修饰的氢氧化铝纳米颗粒(HS)增强树突状细胞(dendritic cell,DC)抗原提呈的作用及其机制.方法:DC负载PEI修饰前后的HS联合卵清蛋白(ovalbum,OVA)抗原后与B3Z细胞共孵育,CPRG(chlorophenol red-β-d-galactopyranoside)方法检测DC对OVA的抗原提呈能力,Western blot检测DC中泛素化OVA蛋白的表达;以不同刺激剂[干扰素(interferon,IFN)-α、R848]与负载HS/PEI-OVA的DC混合后,收集培养上清ELISA检测白介素(interleu-kin,IL)-12的表达,与B3Z共孵育后CPRG方法检测不同刺激剂对HS/PEI增强DC抗原提呈的作用;DC负载HS/PEI-OVA后与OT-Ⅰ T细胞共孵育,检测OT-Ⅰ T细胞增殖;皮下接种小鼠黑色素瘤细胞B16-OVA构建小鼠黑色素瘤模型,探讨负载HS/PEI-OVA的DC疫苗体内诱导CD8+IFN-γ+T细胞比率上升及特异性T细胞分泌IFN-γ的能力.结果:与未经PEI修饰的HS相比,HS/PEI能显著增强DC对OVA抗原的提呈能力,并增加DC中泛素化OVA蛋白的表达及IL-12的分泌;IFN-α、R848均可进一步增强DC对HS/PEI-OVA的提呈作用;DC负载HS/PEI-OVA可显著促进OT-Ⅰ T细胞的增殖;DC-HS/PEI-OVA疫苗小鼠体内能诱导高效的T细胞应答.结论:HS/PEI能显著增强DC对抗原的交叉提呈,诱导高效的T细胞应答.
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