【摘 要】
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为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法,对太子参药材及其混伪品的r DNA-ITS片段进行比对分析,找出特异性片段,设计太子参鉴别引物,并优选扩增条件,扩增产物经100×SYBR Gr
【机 构】
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贵阳中医学院,中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地,
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为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法,对太子参药材及其混伪品的r DNA-ITS片段进行比对分析,找出特异性片段,设计太子参鉴别引物,并优选扩增条件,扩增产物经100×SYBR Green I染色后紫外光下观察。结果显示,PCR扩增反应液(包括DNA Taq聚合酶预混液5.5μL,Tzs-2F,Tzs-2R各10 pmol,DNA模板20~80 ng,双重灭菌蒸馏水加至25μL)经95℃预变性1 min,95℃变性5 s,56℃退火延伸15 s,30个循环,72℃后延伸30 s后,在扩增产物中加入1μL100×SYBR Green I混匀后于紫外光下呈绿色荧光的为太子参,混伪品无绿色荧光出现。40 min内即可完成DNA提取、扩增等整个鉴定过程。该方法能特异性扩增太子参DNA,紫外光下肉眼观察即可鉴定药材的真伪,且操作简捷、结果准确、利于推广,可为快速鉴定中药材的真伪提供参考。
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