【摘 要】
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为制备猪轮状病毒VP7蛋白的多抗,构建大肠杆菌表达载体pQE-30-VP7,表达猪轮状病毒VP7蛋白,纯化重组蛋白VP7并对其进行鉴定。利用RT-PCR方法扩增出猪轮状病毒VP7全长基因1062
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
【基金项目】
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国家科技支撑计划课题(2012BAD12B05-2);黑龙江省教育厅项目(12521372);黑龙江省垦区科研攻关项目(HNK135-04-06)
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为制备猪轮状病毒VP7蛋白的多抗,构建大肠杆菌表达载体pQE-30-VP7,表达猪轮状病毒VP7蛋白,纯化重组蛋白VP7并对其进行鉴定。利用RT-PCR方法扩增出猪轮状病毒VP7全长基因1062 bp,克隆到pMD18-T载体中,利用SalⅠ和HindⅢ消化重组DNA进行酶切鉴定,定向克隆到表达载体pQE-30中,转化E.coli BL21（DE3）株,经PCR和酶切鉴定阳性质粒,经IPTG（终浓度为1 mmoL·L^-1）37℃进行诱导,Western blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的反应
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