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通过对硅胶基质进行化学改性键合伴刀豆球蛋白（ConA），制备了对糖蛋白具有特异亲和作用的亲和色谱固定相；该固定相非特异性吸附弱，对于糖蛋白和糖肽的分离效果良好。对亲和色谱的分离条件进行了优化．以标准糖蛋白核糖核酸酶B（RNase B）为模型，对其进行了纯化；用糖苷酶切除糖链，并对切除糖链前后的RNase B用胰蛋白酶酶解；用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF MS）对亲和色谱分离得到的糖蛋白、糖链及糖肽进行了分析，确定了RNaseB的一级结构、糖含量、糖基化位点及糖连接方式。该方法快速准