环介导等温扩增技术检测新兵腺病毒感染研究

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zbtoy
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目的建立环介导等温扩增(LAMP)方法,用于腺病毒7、14和55型感染检测。方法针对腺病毒7、14和55型Hexon区段设计4条特异性引物,建立LAMP预反应体系。然后对反应温度和时间进行优化;通过与PCR比较评估该方法的特异性和灵敏度,同时观察使用钙黄绿素染料的检测效果,最后对40例新兵鼻咽分泌物标本进行检测。结果优化的LAMP最适扩增温度为65℃,扩增时间为60min。建立的LAMP方法特异性好,只有腺病毒7、14和55型扩增阳性。LAMP可以使1︰1 000倍稀释的腺病毒DNA得到扩增,其灵敏度比PCR高10倍。同时用LAMP和PCR法对新兵腺病毒感染情况用SPSS软件进行比较,结果LAMP法与PCR法的一致性较差(Kappa=0.562,P<0.05),而与荧光定量PCR(FQ-PCR)一致性较高(Kappa=0.818,P>0.05)。利用染料钙黄绿素进行可视化检测的效果和电泳方法相当。结论 LAMP法检测腺病毒7、14和55型感染优于PCR法,这种新方法也适用于基层医院实验室和流行区。
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