【摘 要】
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目的 构建丙型肝炎病毒（HCV）2a型非结构蛋白4B（NS4B）的真核表达载体,并观察其对骨肉瘤细胞U2OS凋亡的影响。方法 以质粒PJFH1为模板,通过PCR反应扩增4目的基因片段,采用同源重组
【机 构】
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山西医科大学汾阳学院科技中心,厦门大学医学院临床医学系,山西医科大学汾阳学院医学检验系
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目的 构建丙型肝炎病毒（HCV）2a型非结构蛋白4B（NS4B）的真核表达载体,并观察其对骨肉瘤细胞U2OS凋亡的影响。方法 以质粒PJFH1为模板,通过PCR反应扩增4目的基因片段,采用同源重组法与PCMV-tag2b载体相连,转化大肠杆菌感受态DH5α,筛选正确的克隆。以脂质体为介导转染U2OS细胞,通过Western blot检测NS4B蛋白的表达,免疫荧光检测细胞的凋亡。结果 构建pCMV-tag2b-NS4B重组质粒,经测序其与NCBI公布的序列完全一致,并可在U2OS细胞中表达,DAPI检测显
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