丝状真菌米曲霉外源基因表达系统的构建

来源 :华南理工大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qweasd123qweqwe
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以米曲霉(Aspergillus oryzae)RIB40的基因组DNA为模板,聚合酶链式反应(PCR)扩增得到启动子、终止子、筛选标记基因等表达元件,依次连接到载体pUC119上,构建了米曲霉的重组表达载体pNMA.将米赫根毛霉脂肪酶基因(RML)连接于pNMA的启动子下,得到表达载体pNMA-RML,通过Apa Ⅰ酶切线性化转化米曲霉宿主菌A.oryzaenia D300,得到整合型的阳性转化子A.oryzae ONL1.其培养7天的培养液的上清液在以三丁酸甘油酯为底物的平板上形成清晰的水解透明圈,碱
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